论文部分内容阅读
目的观察甘草酸二铵(DG)对百草枯(PQ)中毒引起急性肾损伤大鼠肾组织的保护作用,研究其作用与Toll样受体4(TLR-4)、髓样分化因子(Myd88)、核因子κB (NF-κB)、对白细胞介素-6(IL-6)及相关信号分子之间的关系,并探讨DG对PQ致急性肾损伤大鼠的肾组织作用机制。方法50只SD大鼠按随机数字表法分为百草枯模型组(PQ组,n=20)、生理盐水对照组(NS组,n=10)和甘草酸二铵干预组(DG组,n=20),PQ组和DG组给予PQ100 mg/kg一次性灌胃,NS组则给予等量生理盐水灌胃。DG组灌胃后立即给予甘草酸二铵50mg/kg腹腔注射。每24 h重复给药一次,观察至72小时,处死大鼠。取腹主动脉血,评估肾功能；病理学观察大鼠肾组织形态学改变,ELISA检测血清和肾组织IL-6的含量,免疫组化采图分析各组TLR4、Myd88及NF-κB P65蛋白表达变化,荧光定量PCR(QRPCR)方法检测肾组织TLR4. Myd88及NF-κB的的基因表达。结果DG组大鼠血清Cr、BUN、IL-6与肾组织IL-6的水平明显低于PQ组(P<0.01),但显著高于NS组(P<0.01)。病理形态学观察,NS组肾组织结构清晰,未见明显水肿、充血、变性等病理学改变；PQ组、DG组镜下可见肾小管上皮细胞肿胀,空泡变性、坏死,管腔狭窄,部分管腔闭锁,且DG组病变轻于PQ组。免疫组化采图分析TLR4主要表达在肾细胞胞膜上,Myd88主要表达在细胞胞质,NF-κB P65主要表达在细胞胞核,同时也有少量表达在细胞质,主要表达于肾小管上皮细胞和肾小球系膜细胞。DG组TLR4、Myd88及NF-κB P65蛋白阳性表达率高于NS组(P<0.01),但低于PQ组(P<0.01)。QPCR结果显示,DG组TLR4mRNA、Myd88mRNA及NF-κB mRNA表达率高于NS组(P<0.01),但低于PQ组(P<0.01)。结论百草枯中毒可致大鼠急性肾损伤,肾小管上皮细胞损伤最为严重;中毒大鼠肾组织中TLR-4 mRNA、Myd88 mRNA、NF-κB mRNA、IL-6表达均显著升高；甘草酸二铵可减轻百草枯中毒所致的急性肾损伤,其机制可能与降低TLR-4、Myd88、NF-κB的表达有关。