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内源性的抗菌肽是天然免疫的重要组成部分,抗菌肽以其广谱的杀菌作用、高效的抗菌活性、靶菌株难以产生抗药性以及天然、安全等优点,有潜力开发成为具有一种优质、高效、无公害、无残留的新型天然抗生素,应用于海洋水产动物病害防治。
论文第一部分设计并合成了三种海洋鱼类抗菌肽Moronecidin-Hepcidin-Pleurocidin融合基因的全序列,在设计过程中考虑了外源基因在原核、真核表达系统中表达所需的一系列因素。成功构建了融合抗菌肽基因的表达载体,包括酵母真核表达载体和原核表达载体,分别在酵母表达体系中和原核表达体系进行表达,以期获得高活性、低成本的水产动物抗菌制剂。
论文第二部分对河豚的TLR1胞外区进行了原核表达研究,同时采用改良的重叠延伸PCR方法,成功获得鱼类抗菌肽hepcidin与TLR1的胞外区相融合的重组分子,并构建了重组表达载体,实现在原核表达系统中的表达。研究工作为利用模式识别受体高效识别病原相关分子模式的特点进行构建能够泛特异性识别并富集于病原菌的高效抗菌肽,打下了基础。