目的：通过克隆人Egr-1启动子，构建由Egr-1启动子调控，含Egr-1-CD基因的重组真核表达载体pcDNA3.1(+)Egr-1-CD并转染鼻咽癌细胞系(CNE)，达到放射线诱导CD／5-Fc自杀基因系统在鼻咽癌细胞中靶向表达，观察基因表达与放射的剂量效应关系，建立肿瘤基因——放射治疗系统，通过放射线和基因的双重作用杀伤肿瘤，提高放射增敏比，降低放疗剂量，减少正常组织损伤。 方法：根据Genbank数据库提供的人Egr-1启动子基因核苷酸序列，设计并合成一对引物，采用PCR方法，从人肝组织DNA中扩增出Egr-1基因片断，与pcDNA3.1(+)-CD定向连接，构建受控于Egr-1启动子的pcDNA3.1(+)-CD真核表达载体pcDNA3.1(+)Egr-1-CD，用限制性内切酶，PCR扩增和DNA测序的方法鉴定真核表达载体pcDNA3.1(+)Egr-1-CD构建成功，并利用脂质体转染的方法转染人鼻咽癌细胞株，经G418筛选后获得表达阳性细胞克隆，RT-PCR分析鉴定转染成功。用不同剂量的X线照射表达阳性的鼻咽癌细胞，观察基因表达与放射的剂量效应关系，进一步体外分组观察不同的放射线诱导CD／5-Fc自杀基因系统对鼻咽癌细胞的杀伤效应，MTT方法检测细胞存活比率，通过绘制不同组鼻咽癌细胞存活曲线，观察放射增敏作用。 结果：成功克隆了人Egr-1启动子，构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)Egr-1-CD，经过限制性内切酶，PCR和DNA测序证实了其正确性，CD基因转染CNE细胞后，经G418筛选后获得阳性克隆株Egr-1-CD—CNE，经RT-PCR分析CD基因已转入CNE细胞并开始转录。电离辐射可诱导增强自杀基因阳性细胞株中CD基因的表达，电离辐射与前药5-Fc的联合应用大大增强了对自杀基因阳性CNE细胞的杀伤作用，其杀伤作用大于单独自杀基因前药系统和单独照射。 结论：真核表达载体pcDNA3.1(+)Egr-1-CD构建及转染CNE细胞成功，建立了基因表达与放射的剂量效应关系，放射线诱导Egr-1-CD／5-Fc体系的放射增敏比明