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白灵菇是一种珍贵的食用菌,白灵菇多糖(Pleurotus nebrodensis polysaccharides,PNPs)具有增强免疫力、抗氧化、抗肿瘤等功能,是一种具有较高开发利用价值的功能性食品。本文研究了菌袋无覆土栽培、菌袋中部环切覆土栽培、脱袋覆土栽培三种栽培方法对白灵菇子实体生长的影响。综合评价得出菌袋中部环切覆土栽培占地面积小,易于管理,更适合进行白灵菇栽培。以白灵菇子实体为材料,采用超声波辅助提法提取白灵菇多糖,选取超声波处理时间、提取温度和液料比进行单因素实验,运用Box-Behnken实验设计对超声波处理时间、提取温度和液料比三个工艺条件进行分析与优化。确定了超声波辅助提取白灵菇多糖的最佳工艺参数为提取温度56℃、超声波处理时间45 min、提取的液料比为41:1,在此条件下进行2次提取,得到白灵菇多糖得率为12.26%,相比于传统热水提取法(提取温度77℃、提取时间190 min、液料比46:1、提取次数为2次)多糖得率提高了44.41%。白灵菇多糖除蛋白结果表明:使用Sevage法,即加入多糖1/3体积的Sevage试剂(氯仿:正丁醇=4:1),震荡30 min,3500 r/min离心10 min,取上清,重复9次,得到的多糖纯度为89.57%,与盐酸法相比除蛋白效果较好,具有较高的应用价值。利用DEAE-52纤维素柱纯化白灵菇多糖,得到蒸馏水洗脱组分PNPsA、0.1 mol/L NaCl洗脱组分PNPsB和0.3 mol/L NaCl洗脱组分PNPsC,共三个多糖组分。体外抗氧化实验表明:超声波辅助提取的白灵菇多糖清除羟基自由基和DPPH自由基的能力强于清除超氧阴离子自由基的能力,在4 mg/mL时白灵菇多糖清除羟基自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的能力分别为98.39%、60.8%和22.06%。经过DEAE柱纯化得到的PNPsA、PNPsB和PNPsC三个组分中都具有清除羟基自由基和DPPH自由基的能力,且清除能力的大小为:PNPsB>PNPs>PNPsA>PNPsC。果蝇生存实验的结果表明,分别向培养基中添加0.25%、0.5%、1%白灵菇多糖会不同程度地提高果蝇半数死亡时间、平均寿命和最高寿命。1%剂量组的雌性果蝇的最高寿命比对照提高10.61%,雄性果蝇的最高寿命比对照提高11.82%,二者均达到显著水平;0.5%剂量组的雌性果蝇的半数死亡时间、平均寿命和最高平均寿命分别比对照提高了23.08%、22.77%、18.24%,其中对平均寿命的提高效果达到显著水平,半数死亡时间和最高寿命的提高效果达到极显著水平;添加0.5%白灵菇多糖的雄性果蝇的半数死亡时间、平均寿命和最高寿命分别提高27.86%、21.01%、20.05%,其中对平均寿命的提高效果达到显著水平,对半数死亡时间和最高寿命的提高效果达到极显著水平。因此,在培养基中添加0.5%白灵菇多糖能够明显延长果蝇的寿命。进一步的研究发现,培养基中添加0.25%、0.5%、1%白灵菇多糖剂量组对果蝇的体重、逆重力爬行能力也有不同程度的增加。用0.5%白灵菇多糖喂养果蝇30天后,雌性和雄性果蝇体重分别比对照显著增加了12.02%和18.77%,逆重力爬行能力显著提高了44.71%和34.80%。果蝇体内抗氧化性测定结果显示,不同白灵菇多糖剂量组喂养30天的雌性和雄性果蝇,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性均升高,MDA含量下降,0.5%剂量组与对照组相比SOD、CAT酶活性升高与MDA含量降低均达到显著水平,推测白灵菇多糖可通过提高抗氧化酶活性,减少脂质过氧化作用,延缓衰老,延长寿命。