基于石墨烯的电化学DNA传感器的研究与应用

来源 :青岛科技大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:joyuan100
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电化学DNA传感器具有灵敏度高、选择性好、样品用量少、消耗低等优点,能够实现对DNA快速准确的检测,在医学诊断、犯罪学、食品安全检测等领域有着重要的应用前景。石墨烯是一种新型的二维单原子层晶体,具有电化学窗户宽、稳定性高、比表面积大、电催化活性高、导电性好和良好的微环境等优点,在电化学传感器和生物传感器领域有着重要的应用价值。本论文内容主要包括以下几个部分:(1)利用壳聚糖作为成膜材料将TiO2纳米棒-石墨烯复合材料修饰在离子液体碳糊电极表面,利用扫描电子显微镜、循环伏安、电化学交流阻抗法对修饰电极进行了表征,将探针ssDNA通过静电吸附固定在修饰电极表面后制备了相应的DNA传感器,与目标序列杂交后利用差分脉冲伏安法检测电化学杂交指示剂亚甲基蓝在不同DNA修饰电极上的电化学信号,实现对目标序列的选择性检测,并成功应用于大豆MON89788转因基序列的PCR扩增产物的检测。(2)利用电化学还原氧化石墨烯的方法制备了石墨烯修饰的离子液体碳糊电极,采用恒电位吸附法将探针ssDNA固定在修饰电极表面制备了DNA传感器,与目标序列杂交后以亚甲基蓝为指示剂,记录其在不同DNA修饰电极表面的差分脉冲伏安曲线,实现了对玉米MON810转基因序列的检测,并成功应用于实际样品中提取的DNA的PCR扩增产物进行了有效检测。(3)采用绿色可控的电化学还原方法在离子液体碳糊电极表面修饰了一层部分还原氧化石墨烯膜,利用电极表面剩余的含氧基团与末端修饰有氨基的探针ssDNA共价键合将探针固定在电极表面;与目标序列杂交后以亚甲基蓝为指示剂检测杂交反应的发生,利用差分脉冲伏安法对大豆A2704-12转基因序列进行了检测,并对实际样品中提取的DNA的PCR扩增产物进行了检测,结果较为满意。(4)合成了羧基化的氧化石墨烯,将其修饰在电聚合L-赖氨酸修饰的玻碳电极表面制备了修饰电极,将带有氨基的探针ssDNA序列通过酰胺键固定在修饰电极表面后制备了DNA传感器,以亚甲基蓝(MB)为指示剂,利用差分脉冲伏安法检测其在不同DNA修饰电极上的电化学信号,实现对目标序列副溶血弧菌tlh基因的检测,并对牡蛎中提取的DNA的PCR扩增产物进行了检测。结果表明,本论文中构建的4种电化学DNA传感器对特定序列目标ssDNA的检测有较高的灵敏度和选择性,可以很好地识别与目标序列相关的错配序列和非互补序列。
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