赤芍801诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡研究

被引量 : 0次 | 上传用户:zhangbo330330
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨赤芍801对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-like synoviocytes, FLS)凋亡的影响。方法:RA患者关节滑液经原代培养分离出FLS,取3-5代的RA FLS用于后续实验。MTT检测细胞增殖抑制。根据MTT结果,将细胞分为高剂量赤芍801组(64μg/ml)、低剂量赤芍801组(4μg/ml)和溶剂对照组,光学显微镜观察其细胞形态;Annexin V-FITC/PI双标记染色检测细胞凋亡率;逆转录PCR和实时荧光定量PCR检测Fas/Fasl mRNA相对表达量;细胞免疫化学方法对P65和P50表达定位进行分析;提取核蛋白,采用免疫印迹方法检测P65和P50表达。结果:经过反复贴壁与传代以后,3-5代滑膜细胞逐渐纯化,RA FLS在无赤芍801刺激下绝大多数为长梭形,少量呈星形、多角形,胞质透亮、均匀,核居中,排列具有局部方向性,低剂量赤芍801刺激24h后无明显改变,但高剂量赤芍801刺激后发生明显改变:细胞由长梭形变成了不规则形或圆形,细胞密度明显降低,体积缩小,核出现固缩,但胞膜和核膜完整。MTT结果显示,赤芍801具有浓度依赖性的抑制RA FLS增殖功能,并在4μg/ml剂量下有统计学意义,P<0.05。流式结果表明,赤芍801具有诱导RA FLS凋亡功能,虽然低剂量组的凋亡率与对照组比较增加不明显,无统计学意义,P>0.05,但高剂量组的凋亡率较对照组显著增加,具有统计学意义,P<0.05。逆转录PCR结果显示,Fas mRNA在RA FLS中有表达,且有随赤芍801浓度增加而表达增加趋势,但Fasl mRNA在RA FLS中未被检测出。实时荧光定量PCR结果指出,低剂量赤芍801刺激的RA FLS Fas mRNA相对表达量较对照组增加不明显,差异无统计学意义,P>0.05,但高剂量差异显著,有统计学意义,P<0.05。细胞免疫化学结果显示,P65和P50蛋白在无赤芍801刺激作用下,主要在RA FLS细胞浆中被检测出,但当高剂量赤芍801浓度刺激24h后,二者在细胞核中的量增加。Western blotting结果指出,P65和P50在RA FLS核蛋白抽提物中被检出,并在高剂量赤芍801组中量显著高于对照组。结论:赤芍801具有诱导RA FLS凋亡功能并引起Fas基因表达上调和NF-κB向核内转移。
其他文献
目的:了解两种不同血清学检测方法检测单纯疱疹病毒IgM抗体的敏感性。方法:收集2018年5-6月50例生殖器疱疹高危人群,分别采用酶联免疫法及化学发光免疫法检测血清中单纯疱疹
积极心理学在中职学校的运用有利于培养中职学生生活的积极心态,有利于解除心理适应障碍,有利于增强学生的技能训练,有利于提高抗挫折能力,有利于营造和谐校园,有利于培养学生的就
2010年9月18日,来自喀什市疏勒县罕南力克镇恰恰甫村的53岁农民艾麦尔·吾舒尔,带着各式各样的馕,大大小小的馕,味道不同的馕,来到地区体育馆。这一次,艾麦尔·吾舒尔不是纯
随着盾构技术在复合地层中的推广应用,盾构工程面临复杂地质情况的挑战越来越多,尤其以开挖断面内局部存在的高强度岩体为甚。在我国东南部沿海城市的花岗岩地层中,如青岛、
在荷载和外界环境因素的综合影响下,随着时间的延长以及轴载次数的逐渐累积,其路面状况以及使用性能就会产生明显破坏。因此定周期检测,并不能满足路面变化对周期检测的要求,
随着信息技术的不断进步,管理信息系统得到了更高层次的发展,成为现代社会的重要标志,也是高校信息化建设的重要组成部分。然而,目前仍有部分高校的行政管理仍然沿袭着传统的
在一个法学研究实践的角度,审视着我国环境行政执法的现状,总结我国环境行政执法存在的问题。用分析比较的方法总结了美国环境行政执法成功的经验,根据我国环境行政执法具体
目的:通过总结分析中南大学湘雅医院近十年来重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)合并真菌感染的病例资料,以求进一步提高SAP合并真菌感染的诊治水平。方法:查阅20
调频广播在我国的发展十分迅速,目前主要包括有线传输与无线覆盖两种形式,将两种形式结合形成调频广播一体网系统是我国调频广播技术发展的重要方向。本文时调频广播的两种传