目的:通过分析降钙素基因相关肽(CGRP)、P物质(SP)在心肌,背根神经节及血清的表达变化与糖尿病大鼠痛觉减退、心肌易损性增加的关系,探讨痛觉减退与糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤易损性增加的相关性。方法:1、Ⅰ型糖尿病大鼠模型的建立:200-250g雄性SD大鼠60只,腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ,50mg/kg)作为糖尿病组(DM组)。将注射STZ后一周内血糖持续>16.7mmol/L为糖尿病造模成功标准;同时喂养30只同周龄的正常大鼠作为对照,每周测量体重、血糖值、热痛甩尾潜伏期(tail flick latency,TFL);注射STZ第五周末采用ELISA法测定两组大鼠血甘油三酯值并比较分析。2、测量甩尾潜伏期及糖尿病分组:根据注射STZ后第5周末测得TFL值是否大于注射STZ前对照值的2倍,将糖尿病大鼠进一步分为DM1组(TFL<对照值x 2)和DM2组(TFL>对照值x 2)。3、测量、分析两组糖尿病大鼠CGRP、SP变化:采用免疫荧光技术和和ELISA法测定心肌、上胸段(T1-5)和腰骶背根神经节(DRG)及血清CGRP,SP的含量:并观察其在心肌处的含量分布。分析DM1组和DM2组上述测量值差异。4、心肌梗死面积及心肌细胞凋亡的分析:采用TTC染色法、TUNEL分析凋亡试剂盒测定分析心肌梗死面积及心肌细胞凋亡程度,并分析DM1组和DM2组上述测量值差异。5、测量、分析糖尿病大鼠神经生长因子(NGF)及辣椒素受体(TRPV1):采用ELISA法和western blot法分别定量分析缺血心肌NGF及TRPV1的表达变化。结果:1、糖尿病组大鼠造模五周后,与对照组相比,体重发生显著降低降低(P<0.01),而血糖在造模早期即升高至糖尿病水平(24h后),且甘油三酯亦出现显著升高。2、糖尿病组大鼠甩尾潜伏期逐渐延长,至5w时有显著性差异。与对照组相比,DM组的CGRP、SP在心肌、背根神经节及血清处的含量均显著下降(P<0.05),且DM2组中CGRP、SP含量显著低于DM1组水平(P<0.05)。3、与I/R组正常大鼠相比,I/R组糖尿病大鼠心肌梗死面积显著增加、心肌细胞凋亡比率均显著升高(P<0.05);DM组中,DM2组大鼠心肌缺血再灌注后,各项心肌损伤指标均显著高于DM1组。与相应的假手术组比较,I/R组正常大鼠CGRP,SP显著升高,I/R组糖尿病大鼠CGRP,SP升高不显著。4、与相应的假手术组比较,正常大鼠I/R组缺血心肌处TRPV1表达显著升高(P<0.05),糖尿病I/R组TRPV1表达变化不显著,并且显著低于非糖尿病组(P<0.05),且DM1组和DM2组相比,缺血心肌处TRPV1表达无显著差异。各组NGF含量变化:与相应的假手术组比较,正常I/R组背根神经节、缺血心肌及血清表达显著升高(P<0.05),糖尿病I/R组NGF表达变化不显著;与对照组相比,DM1组NGF含量显著升高(P均<0.05),而DM2组NGF含量显著下降(P<0.05)。结论:1、糖尿病组大鼠在注射STZ后痛觉逐渐减退,表现为甩尾潜伏期持续升高,而正常组大鼠甩尾潜伏期无显著改变;糖尿病大鼠个体甩尾潜伏期变化率不同,反映其外周和内脏感觉神经病变程度不同,并且与感觉神经CGRP,SP显著降低程度相关。2、甩尾潜伏期变化率较高的DM组大鼠(DM2组)对心肌缺血再灌注损伤更敏感,推断这可能与DM2组CGRP,SP含量与DM1组相比显著下降有关。3、糖尿病大鼠NGF和TRPV1的变化可能与感觉神经病变及CGRP、SP含量变化有关。