磁性荧光多功能PGMA微球的制备与应用

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本文采用分散聚合法制备微米级单分散聚甲基丙烯酸缩水甘油酯( Poly(Glycidyl Methacrylate) , PGMA )微球。实验以偶氮二异丁腈( 2,2’-azo-bis-isobutyronitrile , (AIBN) )为引发剂、聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,(PVP))为分散剂、乙醇和水为反应介质,研究了初始单体(GMA)浓度、PVP浓度和反应温度对PGMA微球粒径和分散度的影响,结果显示在初始单体浓度15 wt%、PVPK-30浓度15wt%、反应温度70℃、聚合时间大于12小时条件下制得的微球粒径均匀、形貌规则,在此条件下成功制备了粒径范围在1.7-3.1μm,变异系数小于5%的单分散PGMA微球。采用乙二胺对PGMA微球进行表面功能化改性,FTIR分析表明在PGMA微球表面成功引入氨基,采用双突跃滴定法定量氨基含量,结果显示微球的氨基含量约为3mmol/g。以制得的氨基化PGMA单分散微球为载体,采用原位合成和溶胀渗入两种方法成功制备了兼具荧光和磁性的多功能高分子微球,经扫描电镜观察多功能微球形貌并计算微球平均粒径和变异系数,显示该微球表面光滑,粒径分布均匀,呈单分散性;XRD和VSM分析表明在微球原位成功生成磁性纳米粒子,微球具有超顺磁性,饱和磁化强度达4.6emu/g;荧光显微镜观察到多功能微球具有较强荧光强度;紫外灯照射下磁分离实验可以直观观察到微球在无外加磁场下,能够稳定的悬浮于水中,在外加磁场作用下,能够迅速的聚集分离,表明微球兼具超顺磁性和荧光特性。将溶胀渗入法制备的氨基化磁性荧光多功能微球应用于免疫学检测,利用戊二醛活化多功能微球表面的氨基,连接羊抗兔IgG抗体,用连接有羊抗兔IgG抗体的多功能微球检测兔IgG和鸡IgG,磁分离除去未反应微球,结果显示,多功能微球能够容易的连接抗体,并能够保持抗体的生物活性,特异性的吸附与抗体相对应的抗原,并具有较小的非特异性吸附性能,在荧光显微镜下能够清晰的分辨出阴阳性对照。同时对多功能微球进行流式细胞仪的检测,结果显示多功能微球具有均匀的尺寸,具有均匀的荧光强度,能够容易的被流式细胞仪检测到信号,可以应用于流式细胞仪的自动化免疫分析。
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