苦瓜枯萎病是一种典型的维管束病害,是影响苦瓜生产的严重障碍之一,难以根除。本研究从不同生境分离的根际细菌中筛选苦瓜枯萎病生防细菌,研究其对苦瓜枯萎病菌的抑制活性、苦瓜枯萎病的防治效果及其定殖能力,探讨生防菌的生防潜力,为苦瓜枯萎病生物防治提供优秀的生防资源。本研究筛选出两株苦瓜枯萎病生防细菌K18-5和KH48-5。两株生防菌均显著抑制苦瓜枯萎病菌菌丝生长和分生孢子的萌发,并对苦瓜枯萎病具有明显的防治效果。在盆栽试验中,K18-5和KH48-5对枯萎病的防治效果分别达到75.27%和69.11%。生防菌K18-5是以10⁸cfu·m L^-1处理浓度,移栽时浸根处理一次、移栽后再灌根处理一次,生防菌KH48-5是以10⁸cfu·m L^-1处理浓度,移栽时浸根处理一次,对苦瓜枯萎病的防治效果最佳,并在苦瓜根际稳定定殖。另外,根据形态特征、生理生化特性和16S r DNA序列同源性分析,K18-5和KH48-5均鉴定为多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）。K18-5和KH48-5均具有良好的根际定殖能力。在皿内采用双层滤纸法测定其定殖密度,K18-5和KH48-5的定殖密度分别为2.45×10⁴ cfu·cm^-1 root和4.60×10³ cfu·cm^-1 root;盆栽检测法测定结果,K18-5和KH48-5在苦瓜根部稳定保持10³cfu·g^-1以上的定殖密度。K18-5和KH48-5不仅在苦瓜根际具有定殖能力,在苦瓜茎部也有一定的定殖密度。另外,病原菌存在显著增加K18-5和KH48-5的定殖密度,在同样处理生防菌和病原菌的条件下,未感病植株的生防菌的定殖密度显著高于感病植株,说明生防菌的定殖密度和生防菌发挥防治效果有密切相关。在田间试验,K18-5和KH48-5均对苦瓜地上部生长没有显著影响,而均显著提高苦瓜根系活力,并对苦瓜根际土壤微生态具有一定的调节作用。K18-5和KH48-5均显著增加根际土壤细菌数量,减少根际土壤真菌的数量,其中镰刀菌的数量比对照显著减少;K18-5和KH48-5均提高苦瓜根际土壤酶活性,脲酶活性分别比对照提高27.65%～47.61%和2.11%～8.65%,磷酸酶活性分别比对照提高17.22%～32.10%和9.35%～34.90%,蔗糖酶活性分别比对照提高25.72%～71.36%和16.05%～101.61%。经酸化沉淀法获得K18-5和KH48-5的抗菌物质粗提液,粗提液均对枯萎病菌具有显著的抑菌活性,并对苦瓜枯萎病具有明显的防治效果。另外,粗提物易溶于极性大的有机溶剂中,不溶或微溶于极性小的有机溶剂,K18-5粗提液在0℃～120℃、p H4.0～8.0保持稳定活性,KH48-5粗提液在20℃～80℃,p H4.0～10.0保持稳定活性。