桔小实蝇BdorOBP50c的表达模式及功能初探

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ourl123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)隶属于双翅目(Diptera)、实蝇科(Tephritidae)、果实蝇属(Bactrocera),又称东方果实蝇。桔小实蝇寄主范围广,繁殖速度快,适应性强,危害性大。目前对桔小实蝇的防治以化学药剂防治为主,然而化学药剂的不合理使用,不仅对环境造成严重的污染,而且使桔小实蝇抗药性不断增强,防控难度进一步提升。近年发展起来的引诱剂对桔小实蝇的防治效果较好,但由于桔小实蝇的嗅觉机制尚不明确,故在实际生产中仍存诸多因素限制引诱剂的进一步推广。因此,探明桔小实蝇对信息化合物反应的分子机制可为该虫的防控提供新的思路和途径。昆虫气味结合蛋白(Odorant Binding Proteins,OBPs)在信息化合物的识别和转运过程中具有十分重要的作用,是昆虫感受环境中寄主挥发物的重要蛋白。据此,本学位论文在筛选鉴定和克隆BdorOBP50c cDNA序列的基础上,通过解析该基因的时空表达模式以及运用RNAi、EAG及行为学分析技术探索该基因的功能,旨在为桔小实蝇的防控提供新靶标和新思路。主要研究结果如下:1桔小实蝇BdorOBP50c的cDNA序列克隆及系统发育分析采用PCR技术,克隆获得桔小实蝇BdorOBP50c的cDNA序列,开放阅读框全长一共753 bp,编码251个氨基酸;N端具有由18个氨基酸组成的信号肽,成熟肽分子量为26.9 KD,理论等电点为5.50;序列比对结果表明,桔小实蝇BdorOBP50c隶属plus-C OBP家族,有8个保守半胱氨酸残基,但缺少最末位的保守半胱氨酸残基。采用邻接法进行系统发育分析,结果显示,根据保守半胱氨酸的数量,聚类为3支,桔小实蝇BdorOBP50c与柑桔大实蝇BminOBP50c同源性最高,相似度达70.38%,与黑腹果蝇DemlOBP50e氨基酸序列相似度较低,仅为5.41%。2桔小实蝇BdorOBP50c的时空表达模式利用RT-qPCR技术,检测了BdorOBP50c在桔小实蝇成虫不同日龄及组织中的表达量。结果显示,桔小实蝇BdorOBP50c在不同日龄的雌虫中表达量相对稳定,不同日龄间的基因表达量无显著差异;桔小实蝇BdorOBP50c在雄虫9日龄的表达量显著高于其它日龄;桔小实蝇BdorOBP50c的表达量在5日龄和9日龄雌雄间存在显著差异,暗示该基因在雌雄之间存在不同的功能。对不同组织定量结果显示桔小实蝇BdorOBP50c在头、胸、腹的表皮组织中以及下颚须、触角、足和翅均有少量表达,但相互之间没有显著差异。BdorOBP50c在脂肪体中表达量显著高于其他组织,推测该基因与脂肪体相关生理功能有关。3桔小实蝇BdorOBP50c对环境胁迫的响应桔小实蝇经低温处理后,BdorOBP50c表达量与对照组相比未发生显著变化;但在高温处理后,该基因的表达量显著降低,分别是对照表达量的22.29%、18.53%和25.41%;以马拉硫磷LC50的浓度处理后,BdorOBP50c在脂肪体中的表达量显著下调;桔小实蝇经饥饿处理后,BdorOBP50c的表达量亦下调,且随着饥饿时间的延长,表达量下调幅度加大,但在恢复食物供给后,该基因的表达量又恢复到处理前水平。4桔小实蝇BdorOBP50c功能初探采用注射dsBdorOBP50c的方法干扰BdorOBP50c的表达,结果显示RNAi对桔小实蝇雌、雄成虫均有效,沉默效率较为稳定,均达80%以上;桔小实蝇RNA i处理的雌虫与对照GFP处理的雌虫对所检测气味化合物的EAG反应无显著差异,但RNA i处理的雄虫与对照雄虫相比对惕各酸乙酯的EAG反应明显降低,且对苯丙噻唑的反应也有降低的趋势,而对γ-辛内酯和(+),二戊烯的EAG反而有增强的趋势。进一步采用引诱装置进行行为学分析,结果显示,RNAi处理的试虫对惕各酸乙酯的行为趋性与对照相比无显著差异。药剂敏感性试验结果表明干扰后试虫对马拉硫磷的敏感性未发生显著变化。
其他文献
从IFC标准、Revit API两个方面进行了数据交换测试,结果表明:采用IFC标准可以完成结构物理模型的数据交换;基于Revit API二次开发的接口主要进行结构分析模型的交换,交换结果
20世纪80年代以来,大规模农村人口涌入城市谋求生计发展,并逐渐形成“家庭化”迁徙的趋势,这种趋势导致城市中的流动儿童数量急剧上涨,从而形成了我国特有的一个弱势群体——流动儿童。他们从相对落后的农村来到发展繁荣的大都市,面临严重的社会适应问题,情绪管理作为社会适应问题至关重要的一方面,越发引起社会各界的关注。根据已有的研究数据,流动儿童在情绪管理方面存在缺陷,大多流动儿童都存在暴躁、自卑、焦虑、抑
<正>如果有平台告诉你,消费多少返还多少,衣食住行包罗万象,这样的好事,你信吗?号称"财富永动机"的广东云联惠网络科技有限公司(以下简称云联惠),打着"消费全返"的旗号,短短
花椒,系芸香科(Rutaceae)花椒属(Zanthoxylum L.)植物花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxim.)的干燥成熟果实。前期,静息态功能性磁共振技术(fMRI,Functional magnetic resonance imaging)研究表明花椒能显著激活海马、海马旁回等与学习记忆相关的脑区,提示我们花椒可能具有改善学习和记忆障碍的活性。然而,其有效的活性部位
急救问题既是一个医疗问题亦是一个法律问题。在我国社会保障机制愈发完善的今天,“120”急救问题却没有相关法律机制的保障无疑是我国法律发展史上的一个空缺。在进入20世纪
<正>◆《童年》经典指数★★★人气指数★★★★★推荐指数★★★★[时代背景]本书成书于1913年,是苏联伟大作家马克西姆·高尔基(1868-1936)自传体小说三部曲(《童年》《在
大数据已经成为鲜明的时代特征,网络上的每一次检索、每一笔交易、资金的每一次流动,都会被纳入数据集合,就商业银行而言,面对爆发式的数据增长,传统的内部审计思维和手段已经无法满足其处理要求;加之经济全球化和金融环境复杂化发展,商业银行面临的各项风险突出,亟待寻求新的技术手段以实现风险管理。拥抱新时代,内部审计被赋予新的使命,习近平总书记也曾公开强调:要加强对内部审计工作的指导和监督,调动内部审计和社会
SS1作为生长抑素(somatostatin-SS)基因家族的最原始基因,是由生长抑素前体(PPSS1)合成,在组织特异的蛋白酶作用下分裂产生的两种生物活性多肽(SS—14和SS-28),分别在C端14位
糖基化修饰后的活性杂环分子由于表现出生物活性进一步提高、水溶性得到改善、毒副作用大大降低等优点而受到越来越多的关注。近年来,新的具有良好生物活性的糖苷类药物不断
质子交换膜燃料电池(PEMFC)作为一种传统能源的替代型新能源,具有高效率、高能量密度和环境友好型等一系列优点,因而成为最有发展前途的一款电池。发展低贵金属含量、高活性和