部分蔷薇属植物核型分析及2n配子研究

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蔷薇属(Rosa L.)植物隶属于蔷薇科蔷薇亚科,全世界共有212种,我国有95种,是世界著名的观赏植物之一,在园林绿化中应用广泛。然而,由于东北地区气候条件的影响,兼具观赏性和抗性的月季品种寥寥无几。野生蔷薇资源抗性好观赏性差,多为二倍体,单倍体花粉不可育、萌发率极低,无法与观赏性较好的四倍体栽培月季品种进行远缘杂交。因此,如何克服远缘杂交不亲和性及不育性,培育出观赏性好且抗性强的品种是我们当前育种工作亟待解决的关键问题。本研究以12个寒地野生蔷薇属种质资源和10个现代月季栽培品种为试材,对未知倍性的6个野生蔷薇种质进行核型分析,观察7个散粉量较大的二倍体野生蔷薇种质的花粉形态,并进行2n配子的研究,以2n配子诱导率较高的5个野生蔷薇属种质作为父本、以观赏性好的10个现代月季品种为母本进行远缘杂交育种,一方面了解蔷薇属植物遗传背景;另一方面诱导具有可育性的2n配子,克服远缘杂交不亲和性及不育性,为蔷薇属植物育种提供理论依据,加快育种进程。本研究主要结果如下:1.本研究通过对未知倍性的野生蔷薇种质进行核型分析,得出染色体形态及核型模式图,结果表明除了白玫瑰(R.rugosa Alba.)初步确定为四倍体外,其余材料均为二倍体。四季玫瑰(R. rugosa f. plena)、红玫瑰(R. rugosa f. plena(Reg.)Bvhouw.)、刺玫蔷薇(R. davurica Pall.)核型公式为K(2n)=2x=14m,属1A型;深山蔷薇(R.marretii)核型公式为K(2n)=2x=12m+2sm,属1B型;长白蔷薇(R.koreana Kom.)核型公式为K(2n)=2x=14m,属1B型。由此可见,核型分析的方法可以作为染色体倍性确定的有效途径之一。根据核型分析可初步确定,深山蔷薇与长白蔷薇亲缘关系较近。2.对散粉量较好的7个二倍体种质的花粉进行扫描电镜观察,结果表明,野生蔷薇属种质花粉形状主要呈超长球形和长球形,均具三萌发沟;花粉大小属于中等孢粉,平均极轴长度为39.36μm,平均赤道轴长度为20.84μm。根据外部纹饰差异聚类分析,得出在相似系数为0.26时,可分为4组。第1组包括单瓣黄刺玫(R. xanthina var. normalis);第2组包括苦水玫瑰(R. sertata×rugosa)、刺玫蔷薇(R. davurica Pall.);第3组包括日本无刺蔷薇(R.multiflora var.)、野蔷薇(R. multiflora Thunb.);第4组包括深山蔷薇(R.marretii)、长白蔷薇(R.koreana Kom.)。花粉形态观察可以为2n配子的鉴定提供依据,亲缘关系分析可在今后的育种中起到指导亲本选配的作用。3.通过2n配子的研究,得出自然条件下2n配子存在率极低,2n配子与正常花粉形状相近,大小约为正常花粉的1.5倍。经秋水仙素诱导,野野蔷薇(R. multiflora Thunb.)、苦水玫瑰(R. sertata×rugosa)、刺玫蔷薇(R. davurica Pall.)、单瓣黄刺玫(R. xanthina var.normalis)、日本无刺蔷(R.multiflora var.)5个种质的2n配子具有明显的诱导效果,不同种质间具有显著性差异且均显著高于对照组及自然条件下产生的2n配子比例。其中野蔷薇(R.multiflora Thunb.)诱导率最高,达到18.12%。说明,秋水仙素诱导是产生2n配子的适宜方法。通过综合分析比较,不同种质最佳诱导条件不同,但当秋水仙素浓度为0.15%、0.20%时诱导效果较好。4.50个杂交组合中有24个杂交组合获得杂交果,占48.0%。共授粉261朵花,得到90个杂交果,总座果率为34.48%,共收获514粒杂交种,萌发150株,总萌发率为29.18%,成苗64株,总成苗率12.45%。5.在远缘杂交过程中,对新引进的现代月季品种进行观察发现,第一玫瑰红、摩纳哥公主2个品种生长健壮、花量繁多,且杂交座果率也较其他品种高,可在今后的育种中优先选作母本,而戴高乐生活力较弱,座果率极低,应选择性淘汰。对于败育的杂交果,可以采用胚挽救的方法进行离体胚培养。
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