毒死蜱是一种广泛用于农业生产中的有机磷杀虫剂,主要用于稻飞虱、稻纵卷叶螟、二化螟等稻田害虫的防治。环境中毒死蜱残留能通过食物链富集对人体健康产生一定的影响。本研究从长期遭受毒死蜱污染的水稻中分离筛选出三株具有毒死蜱降解特性的内生菌,将三株内生菌分别定殖到水稻中,研究其对水稻生长以及毒死蜱降解的影响,并初步解析内生菌与水稻协同促进毒死蜱残留代谢的机制。主要研究内容及结果如下:1.从长期受到毒死蜱残留污染的水稻中分离出三株具有毒死蜱降解特性的内生菌,分别命名为DJ-1、DJ-2、DJ-3,三株菌能在以毒死蜱作为唯一碳源的无机盐培养基中生长。经过16Sr DNA鉴定,DJ-1为沙雷氏菌,DJ-2和DJ-3为芽孢杆菌。建立了无机盐培养基中毒死蜱的提取、气相色谱检测方法。在加有毒死蜱的MSM培养基中培养15 d,DJ-1、DJ-2、DJ-3对毒死蜱的降解率分别为16.94%、21.60%、19.32%。以毒死蜱的降解率为研究对象,以培养温度、培养基p H和毒死蜱浓度作为自变量,使用中心组合响应面法优化了三株内生菌的体外降解条件。菌株DJ-1最佳降解条件为温度32℃、p H=8.3、毒死蜱浓度为35 mg/L,毒死蜱降解率为17.48%;菌株DJ-2最佳降解条件为温度30℃、p H=7.5、毒死蜱浓度为25mg/L,毒死蜱降解率为24.11%;菌株DJ-3最佳降解条件为温度30℃、p H=7.8、毒死蜱浓度为30 mg/L,毒死蜱降解率为22.45%。2.使用三亲本杂交法将绿色荧光蛋白基因分别成功导入DJ-1、DJ-2、DJ-3这三株菌,并通过浸根法将带有绿色荧光蛋白的三株菌分别定殖到三叶一心期的水稻中,使用激光共聚焦显微镜观察这三株菌在水稻不同组织中的分布情况。使用抗生素标记法计算得到三株内生菌在水稻中的定殖动态。DJ-1、DJ-2、DJ-3定殖水稻能够显著促进毒死蜱胁迫下水稻植株的生长,相比于对照组,内生菌定殖的水稻鲜重提高了44.28%-64.66%。DJ-1、DJ-2、DJ-3定殖水稻对水稻中毒死蜱的降解也有一定的促进作用,内生菌定殖水稻中毒死蜱降解半衰期缩短了0.5 d-1.0d。3.体外促生试验表明DJ-1、DJ-2、DJ-3都能够产生吲哚乙酸（IAA）与铁载体、具有氨基环丙烷羧酸（ACC）脱氨酶活性并且具有磷溶解特性,能够促进水稻快速生长,并且增强水稻对毒死蜱残留的降解代谢。对水稻进行毒死蜱处理后,水稻中细胞色素P450含量显著上升,羧酸脂酶活性受到抑制,谷胱甘肽-S-转移酶活性没有发生显著性的变化;内生菌DJ-1、DJ-2、DJ-3定殖水稻后,和对照组相比细胞色素P450含量、羧酸脂酶活性没有发生显著的变化,谷胱甘肽-S-转移酶活性显著上升。