电化学免疫传感器是将免疫技术和电化学检测方法结合起来的一种标记免疫分析传感器,利用多种方法将肿瘤相关抗原/抗体固定在电极表面,通过固定化的分子识别物质和分析物或标志物之间的免疫反应,把抗原和抗体结合的信息转变为可以检测的电化学信号(电流或电位等),实现肿瘤细胞因子的快速、灵敏、准确检测。本论文利用硼酸自组装单层与糖化蛋白质分子间的特定相互作用,发展了两种可重复使用的安培免疫传感器。该传感器通过在金丝电极表面自组装APBA-MUA/MU杂合单层,并进一步利用硼酸基团与糖化蛋白质分子中的糖残基的相互作用将酶标记的癌胚抗体CEA和前列腺特异性抗体PSA吸附在电极表面。循环伏安(CV)、电化学阻抗(EIS)、蛋白质光活性试验和表面等离子体共振(SPR)测量证明利用自组装技术可在金电极表面形成致密的硼酸单层,该单层可通过硼酸基团与糖分子的特定相互作用识别糖化蛋白质抗体,并进一步识别其抗原形成免疫配合物,使电极的电化学阻抗增加,对H2O2还原的催化响应降低。此外,该糖化蛋白质与硼酸基团的识别作用是可逆的,在偏酸性条件或有山梨醇存在的条件下,糖化蛋白质抗体能够从硼酸单层上剥离下来,该传感器可进一步识别抗体并与其抗原生成免疫配合物,使传感器可重复使用,对CEA传感器重生四次标准偏差为7.1%,对PSA传感器重生十次标准偏差为3.3%(S/N=3)。同时研究了免疫检测条件如温育时间、温度、测定液pH值等对安培测定的影响,最佳实验条件下CEA抗原、PSA抗原的线性检测范围分别为2.0~40.0ng mL-1,2.0~45.0ng mL-1,检测限分别为1.1 ng mL?1, 3.3 ng mL?1。将CEA,PSA抗原的血清样品检测与现用标准方法对照,得到可以相当的准确度。