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目的 1.建立盐酸地芬尼多中毒死亡、死后再分布、死后弥散的动物模型,观察动物的中毒表现和死后各组织脏器的病理变化; 2.研究盐酸地芬尼多致死动物体内的死后分布和死后再分布,为盐酸地芬尼多中毒死亡案件的法医学鉴定提供科学依据; 3.研究盐酸地芬尼多在家兔体内的死后弥散特点,探讨死后再分布的可能机制。方法 1.动物模型及检材采集和处理 1.1 死后分布模型大鼠22只,分两组(1600mg/kg、800mg/kg。第1组6只,盐酸地芬尼多1600mg/kg灌胃。第2组16只,盐酸地芬尼多800mg/kg灌胃,观察4小时,未死者,颈椎脱臼致死。待呼吸和心跳全部消失时,迅速解剖大鼠,取脑、心、肺、肝、脾、肾、脑、胃和心血等组织脏器和体液,检测其中盐酸地芬尼多含量。 1.2 死后再分布模型大鼠30只,分别灌服盐酸地芬尼多800mg/kg,观察4小时,颈椎脱臼致死。待染毒大鼠呼吸和心跳全部消失后,立即分别置于室温下,分别于死后0,4,8,16,24,48,72小时提取大鼠的心血、心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉(左腿)和心血,检测其中盐酸地芬尼多含量。 1.3 死后弥散动物模型 1.3.1 死后弥散家兔24只完全夹闭气管12分钟后,分别经灌胃管灌入盐酸地芬尼多400mg/kg,分别于灌胃后1、3、6、12、24、48、72、96小时各解剖3只,取材。 1.3.2 剂量对死后弥散影响 家兔12只,分4组,完全夹闭气管12分钟后,分别经灌胃管灌入盐酸地芬尼多400mg/kg、200mg/kg、80mg/kg、40mg/kg,24小时后取材。 1.3.3 死后灌胃时间对死后弥散影响 家兔12只,分4组,完全夹闭气管12分钟后0分钟、30分钟、60分钟、120分钟分别经灌胃灌入盐酸地芬尼多400mg/kg,24小时后取材。 采取家兔的心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、心血、外周血、胆汁和尿,检测其中盐酸地芬尼多含量。 2.病理观察取死后分布模型脑、心、肝、脾、肺、肾等组织,用4%甲醛固定,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜观察。 3.盐酸地芬尼多检测方法 样品匀浆后,加入内标,经酸、碱处理后,乙醚萃取,气相色谱和气相色谱-质谱联用检测,根据盐酸地芬尼多的特征离子峰、保留时间定性,工作曲线法定量。