根据世界卫生组织(WHO)2008年的统计数据，子宫颈癌是发生在妇女人群中的第二大癌症，其发病率仅次于乳腺癌。随着分子生物学等技术的快速发展，人们发现高危型人乳头瘤状病毒(Human Papillomavirus，HPV)的持续感染是引发子宫颈癌的发生与发展的必要因素。因此，对高危型人乳头瘤状病毒的检测与精确分型是子宫颈癌的筛查、预防、跟踪治疗及HPV疫苗免疫效果评价的重要手段之一，具有非常重要的指导意义。　　 本论文针对现有的一些HPV检测方法中检测灵敏度低、检测步骤繁琐、耗时长等方面的不足，将PCR扩增技术与核酸膜层析技术巧妙地结合在一起，建立了一种中通量的多重多色核酸膜层析方法用于对13种高危型HPV同时进行检测和精确分型。首先，通过多重不对称PCR对13种高危型HPV进行扩增，富集得到大量的单链DNA产物;然后将PCR产物加入到多重多色核酸试纸条上，通过层析膜不同位置上的捕获探针及标记了不同荧光基团的检测探针对扩增得到的单链DNA产物进行检测和精确分型。本方法在PCR扩增完成后只需要一步操作即可快速获得检测与分型的结果(15-20 min)。检测与分型结果可通过便携式的试纸条荧光扫描仪进行荧光信号的扫描，最后根据荧光信号通道及荧光信号峰出现的物理位置即可同时对13种高危型HPV进行精确的分型。不同HPV型别的质粒模板及742份HPV临床标本的实验结果表明，本方法对13种高危型HPV的检测与分型结果准确可靠，且具有很高的灵敏度和特异性。　　 本研究利用膜层析方法可自动分离已反应分子与未反应分子的优点，消除了目前应用较为广泛的反向杂交方法（需要反复洗涤和温育等步骤）中操作步骤繁琐、耗时长的缺点，整个检测过程（包括PCR扩增）可在2.5小时内完成，简便快速，且灵敏度和特异性均可比于市场上的同类产品，因此在HPV的大范围筛查及流行病学预防控制中具有很大的优势。另外，本论文创新性地将荧光基团标记的探针应用于膜层析体系，建立了多重多色膜层析检测体系，使得层析试纸条的检测通量水平上升了一个层次，为膜层析体系的发展提供了一个新的发展思路。我们相信本论文介绍的多重多色膜层析方法的检测通量可进一步拓展，并且可以应用于其它多种对象的检测与区分。