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目的在前期筛选优化并获得了较好的二仙增效减毒配伍方的基础上,进一步研究比较优化后的配伍方及其单味方对肾阳虚证小鼠的补肾壮阳作用的影响,并分析讨论二仙药对配伍改善肾阳虚症状可能的机制。方法取77只1CR小鼠,按体重值随机分为7组,即正常组、模型组、阳性组、仙-淫1：2组、仙-淫1：1组、仙-淫1：0组、仙-淫0：1组。除正常组外,其余各组小鼠均每天灌胃给予腺嘌呤混悬液,1h后,各给药组给予相应的药物,正常组、模型组给予等量的蒸馏水,连续给药4周。每周检测各组小鼠体重、摄食量、饮水量；给药2周、4周时,检测小鼠体温；实验结束时,各组小鼠眼眶取血,完整剖取小鼠肝脏、双侧肾脏、胸腺、双侧睾丸组织,称重并计算脏器指数,检测血清ACTH含量和肝脏CYP活性等指标。运用荧光定量RT-PCR和Western Blot法,分别测定各组小鼠肝脏CYP1A2、 CYP2E1、CYP3A11和肾脏OAT1、OAT3、OCT2的mRNA和蛋白表达量。结果与正常组比较,模型组小鼠体重、摄食量、体温、脏器(肝、肾、胸腺、睾丸)重量、脏器指数(胸腺)、血清ACTH含量、酶(CYP1A2、CYP3A11)活性、蛋白(CYP1A2、CYP3A11、OCT2)表达量等指标均明显下降,而酶(CYP2E1)活性、蛋白(CYP2E1、OAT1、OAT3)表达量升高。与模型组相比,配伍方组小鼠体重、脏器(肝、肾、睾丸)重量及脏器(胸腺)指数、体温、血清ACTH含量、酶(CYP1A2、 CYP2E1)活性、蛋白(CYP1A2、OCT2)表达大量等指标均有所上升,而酶(CYP2E1)活性、蛋白(CYP2E1、OAT1、OAT3)表达量等指标有所下降；单味方组小鼠脏器(肝、肾、睾丸)重量及脏器(胸腺)指数、蛋白(CYP1A2、CYP3A11、OCT2)表达量等指标均有所上升,而蛋白(CYP2E1、OAT1、OAT3)表达量等指标有所下降。与单味方组相比,配伍方组小鼠体温、肝脏重量、蛋白(CYP1A2、OCT2)表达量等指标有所上升,而蛋白(OAT1、OAT3、CYP2E1)表达量均有所下降。结论配伍方对肾阳虚证的治疗效果优于单味方,其最佳配伍比例为仙-淫1：2,其改善肾阳虚症状的机制可能是通过以下两种情况共同调节：①通过调节肾上腺皮质类固醇激素、酶(肝CYP1A2、CYP2E1)而发挥作用的；②通过下调肾离子转运体OAT1、OAT3的表达和上调OCT2的表达,减少阴离子物质在肾小管上皮细胞中累积,从而起到对肾脏的保护作用；同时实验结果表明肝脏代谢酶CYP1A2和CYP2E1可能存在拮抗的药理毒理作用,二仙药对配伍可能通过影响两种酶之间的动态平衡,改善小鼠的肾阳虚症状。