【摘 要】
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目前,枸橼C-05(Citrus medica L.)是已鉴定的抗溃疡病唯一柑橘属种质。为探究枸橼C-05抗性遗传规律,本研究分析了3种不同重悬缓冲液对不同生长期的柑橘溃疡病菌的增殖影响,筛选的重悬缓冲液和合适的生长期为人工接种溃疡病,准确评价枸橼种质及枸橼杂种后代对柑橘溃疡病菌的抗性反应提供了基础。利用活体注射接种,进一步评价了前期得到的65株沙田柚和枸橼C-05杂交苗极抗植株的抗病性。由于枸橼
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目前,枸橼C-05(Citrus medica L.)是已鉴定的抗溃疡病唯一柑橘属种质。为探究枸橼C-05抗性遗传规律,本研究分析了3种不同重悬缓冲液对不同生长期的柑橘溃疡病菌的增殖影响,筛选的重悬缓冲液和合适的生长期为人工接种溃疡病,准确评价枸橼种质及枸橼杂种后代对柑橘溃疡病菌的抗性反应提供了基础。利用活体注射接种,进一步评价了前期得到的65株沙田柚和枸橼C-05杂交苗极抗植株的抗病性。由于枸橼种质具有多样性,不同枸橼品种对柑橘溃疡病的抗病性存在差异,但这种抗病性差异与枸橼种质间的遗传差异和亲缘关系是否相关尚不清楚。本研究利用三种分子标记对14份枸橼种质和4份对照材料进行遗传多样性分析,通过分析鉴定枸橼C-05与其它枸橼种质的亲缘关系,为枸橼类种质对柑橘溃疡病菌的抗性分析及进一步解析枸橼C-05的抗性机理提供参考。主要结果如下:(1)对接种柑橘溃疡病最佳缓冲液与生长期进行比较分析,得到了硫酸镁为最佳重悬液,可最大程度上保持柑橘溃疡病菌的活性,为保证接种浓度的准确性,接种OD600=0.62与OD600=0.30为最佳生长期,应在放置时间不超过4h内完成接种,试验时长超过4小时,可以选用无菌水重悬菌液。(2)对前期离体鉴定得到的65株沙田柚与枸橼C-05极抗杂种后代进行活体注射接种,根据抗病指数和发病情况进行分析,得到抗病植株10株,感病植株39株,极感病植株16株,且抗病植株的抗病程度低于父本枸橼C-05。(3)通过SRAP和SSR分子标记中筛选出65个种质特异性标记。与枸橼C-05关系最近的美国枸橼、普通香橼,表现为抗病,说明枸橼的亲缘关系与抗柑橘溃疡病具有一定的相关性。(4)通过SRAP、SSR和cp SSR初步确定2个杂种起源的枸橼。木里香橼可能父本为枸橼,母本为与柠檬(C.limon(L.)Burm.f)血缘相近的酸橙(C.aurantium L.)杂种起源;印度大果可能是父本为枸橼,母本为大翼橙亚属小花橙(C.micrantha Wester)或近缘种的杂种起源。
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