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目的:利用氧化应激动物模型评价传统蒙药五根的水提取物和乙醇提取物的抗衰老作用。方法:选择健康的成年雄性Wistar大鼠,随机分为8组,每组8只。即空白组、顺铂(CP)模型组、阳性对照DHEA组(5.166mg/kg)、阳性对照qinaskul组(12.4mg/kg)、五根水提物低剂量组(497mg/kg)、五根水提物高剂量组(994mg/kg)、五根乙醇提取物低剂量组(43.736mg/kg)、五根乙醇提取物高剂量组(262.416mg/kg)。给药15天后处死动物,取血清、睾丸组织、附睾尾部精子,检测相关指标。除了空白组外,其他组在第10天一次性腹腔注射CP为7.5mg/kg,进行造模。(1)造模:常规制备睾丸组织病理切片,HE染色后在显微镜下观察病理学变化。(2)细胞凋亡:通过用Q-PCR法检测睾丸组织中的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和β细胞白血病-2蛋白酶(BCL-2)的m RNA表达水平。(3)睾丸功能:通过采用尼康DS型显微镜和NIS-Elements软件测定精子浓度和活力,并用Elisa法检测血清中的睾酮(Testosterone)的含量。(4)氧化应激指标:用生化法分别检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA),并用Q-PCR法检测睾丸组织中的超氧化物歧化酶2(SOD2)的m RNA表达水平。(5)线粒体稳定性:通过采用化学荧光测定法检测睾丸组织中的ROS含量和用Q-PCR法检测睾丸组织中的解偶联蛋白2(UCP2)m RNA表达水平。(6)端粒变化:采用Elisa法检测血清中的端粒酶含量。结果:(1)与空白组比较CP模型组的睾丸重量显著性降低(P<0.05)。而从病理切片上看,模型睾丸组织精小管基膜显著性的增厚,生精细胞及支持细胞排列不整齐、层次减少,管腔内成熟精子数量减少,发生睾丸组织损伤。证明CP造模已成功。给药后睾丸重量有回升的现象,但是DHEA组和五根水提物高剂量组的回升度不明显(P>0.05)。同时从病理切片的结果上看,给药组的睾丸组织的损伤有恢复的现象;生精细胞和支持细胞的结构、排列、密度和层次完整性接近于空白组,能够观察到管腔内成熟精子数量增多。(2)与空白组比较,CP模型组的Caspase-3 m RNA表达水平显著上调,BCL-2 m RNA表达水平著性的下调(P<0.01),证明模型组的睾丸组织发生细胞凋亡。给药后与模型组比较,qinaskul组、DHEA组、五根乙醇提取物低剂量组和水提物高剂量组的Caspase-3 m RNA表达水平显著性下调(P<0.05),其他组的无明显差异(P>0.05)。而qinaskul组和DHEA组的BCL-2 m RNA表达水平显著性的上调(P<0.01),五根乙醇提取物低剂量组的显著性的上调(P<0.05),其他组的无明显差异(P>0.05)。(3)与空白组比较,模型组的精子活力和浓度下降(P<0.01和P<0.05),血清中的Testosterone的含量也非常显著性的下降(P<0.01),证明模型组的睾丸组织功能有所减弱。给药后精子的活力与模型组比较,给药组的都有显著性的增多(P<0.01)。但是精子的浓度与模型组比较五根乙醇提取物的低剂量组和qinaskul组的有显著性增多(P<0.05),其他组无显著性差异(P>0.05)。Testosterone的含量与模型组比较,五根乙醇提取物低剂量组,水提取物高剂量组和DHEA组显著性增加(P<0.05),其他组无明显差异(P>0.05)。(4)与空白组比较,模型组的血清MDA和GSH含量下降(P<0.05)、CAT含量和睾丸组织中SOD2 m RNA表达水平显著性的下降(P<0.01),说明模型组的氧化应激效应增强。给药后与模型组比较,五根乙醇提取物低剂量组和水提物低剂量组的MDA含量显著性的下降(P<0.01),qinaskul组的MDA含量下降(P<0.05),其他组的无明显差异(P>0.05)。五根乙醇提取物低剂量组和水提物高剂量组的GSH含量显著性的增多(P<0.01),五根水提物低剂量组和qinaskul组的GSH含量增多(P<0.05),其他组的无明显差异(P>0.05)。qinaskul组和DHEA组的CAT含量显著性的增多(P<0.01),五根乙醇提取物低剂、高剂量组,水提取物低剂量组的CAT含量增多(P<0.05),其他组的无明显差异(P>0.05)。五根乙醇提取物低剂、高剂量组和qinaskul组的SOD2m RNA表达水平增多(P<0.05),其他组的无明显差异(P>0.05)。(5)与空白组比较,模型组的ROS含量和UCP2m RNA表达水平增多(P<0.01和P<0.05),说明模型组的线粒体膜变得不稳定。给药后,与模型组比较五根乙醇提取物低剂组和DHEA组的ROS含量显著性的下降(P<0.01),qinaskul组的ROS含量增多(P<0.05),其他组的无明显差异(P>0.05)。五根水提取物低剂、高剂量组和qinaskul组的UCP2m RNA表达水平显著性的下降(P<0.01),DHEA组的UCP2的m RNA表达水平下降(P<0.05),其他组的无明显差异(P>0.05)。(6)与空白组比较,模型组的血清中的Telomerase的含量下降(P<0.05),说明模型组老鼠的端粒很可能已变短。给药后五根乙醇提取物的低剂量组和五根水提取物的高剂量组的Telomerase含量增多(P<0.05),DHEA组的Telomerase含量显著性增多(P<0.01),其他组的无明显差异(P>0.05)。结论:(1)CP诱导的睾丸损伤模型建立成功。引起睾丸的细胞凋亡CP,从而引起睾丸功能衰退。(2)五根(Pentamon)水提物和乙醇提取物均可阻止睾丸损伤,并通过增强精子活力、浓度和Testosterone含量恢复睾丸功能;通过增加SOD、GSH、CAT的含量,降低MDA含量来减弱氧化应激效应。五根(Pentamon)水提物和乙醇提取物同时下调ROS和UCP2含量,提高线粒体功能;通过防止端粒的耗损,从而抗衰老。