背景:至今,梅毒活动性和疗效评价依然困难,缺乏梅毒疗效评判标准,临床上通常采用血清非特异性抗体滴度和/或滴度四倍下降作为参考指标。然而,有关梅毒患者在梅毒螺旋体(Treponema pallidum,T.pallidum)自然感染过程中非特异性抗体变化仍然不清。本研究建立T.pallidum感染早期梅毒兔模型,监测自然感染和抗生素治疗过程中血清Rapid Plasma Reagin(RPR)滴度和皮损中核酸载量变化,以及不同脏器中梅毒螺旋体核酸的分布,并进一步采用脏器标本接种新西兰兔观察感染率和疗效,探究实时荧光定量PCR技术在早期梅毒活动性和疗效判断中的应用价值。方法:选择梅毒血清抗体阴性的新西兰雄兔各10只,采用背部接种法分别接种梅毒螺旋体Nichols和Amoy株。然后,随机将10只兔分为两个亚组:苄星青霉素(Benzathine penicillin G,BPG)治疗亚组和未治疗亚组。定期采集血清、皮损和脏器标本,检测血清RPR滴度、皮损和脏器T.pallidum DNA和mRNA载量,并进行脏器标本接种兔感染性试验(rabbit infective test,RIT)。结果:不论是Nichols组还是Amoy组,BPG治疗亚组的皮损直径都明显小于未治疗亚组(p<0.05)。同一种梅毒螺旋体株接种的感染兔血清RPR滴度在两个亚组之间没有差异(P>0.05)。血清RPR滴度在Nichols组中总体低于Amoy组。有趣的是,我们发现血清RPR滴度四倍下降不仅发生在BPG治疗兔,也出现于未治疗兔,此外,RPR滴度四倍下降率与其基线滴度有关。我们还发现在BPG治疗之后皮损DNA载量迅速下降,明显低于未治疗亚组(p<0.05),与皮损直径的变化一致。同时,BPG治疗之后皮损中mRNA的表达迅速下降,明显低于对照组(p<0.05),并在BPG治疗一周后转阴。兔感染性试验显示未治疗兔脏器标本的转染成功率(5/6,83%)与睾丸和淋巴结混合脏器中T.pallidum mRNA阳性率(5/6,83%)相一致,我们还发现睾丸中的核酸阳性率(11/12,92%)高于淋巴结(7/12,58%)。另外,T.pallidum mRNA诊断梅毒活动性的敏感性(89.9%)明显高于RPR滴度四倍下降(30%),与RIT一致(66.7%),特异性在这三种方法中也较一致。结论:在早期梅毒兔中,血清RPR滴度的四倍下降不适合作为疗效评价的指标。相反,皮损中的T.pallidum mRNA表达和DNA载量变化可以作为梅毒活动性和疗效评价的指标。此外,通过检测睾丸和淋巴结中T.pallidum mRNA水平可以替代兔感染性试验,提高梅毒活动性诊断。