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目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者的循环骨髓瘤细胞(CMCs)数量和髓内瘤细胞(MMCs)的相关性以及CMCs与MM临床相关指标的关系,评价CMCs反映骨髓瘤细胞负荷及病情进展的可行性。建立一套免疫磁珠(IMB)富集、筛选CMCs的方法,用于监测MM的MRD和复发。方法(1)CMCs和MMCs的相关性分析:应用流式细胞术(FCM)检测82例MM患者与30例非浆细胞相关疾病的贫血患者的CMCs和MMCs的比例,探讨两者相关性,分别比较两者在各疗效组中的差异,分析CMCs与MM临床相关指标的关系。(2)用骨髓瘤细胞系U266建立细胞浓度梯度模型,FCM分别检测每个模拟浓度点时抗APC磁珠分选前后的U266细胞比值,即直接FCM组和IMB-FCM组,根据抗APC磁珠靶向抗原CD38-APC/CD138-APC的不同,两组又分为CD38-直接FCM组和CD138-直接FCM组以及CD38-IMB-FCM组和CD138-IMB-FCM组。分别比较IMB-FCM组和相应的直接FCM组U266细胞的比值,确定IMB-FCM检测瘤细胞的敏感度。(3)收集32例MM患者的骨髓和外周血标本,分为骨髓直接FCM组、外周血CD38-直接FCM组、外周血CD38-IMB-FCM组、外周血CD138-直接FCM组、外周血CD138-IMB-FCM组,分别比较外周血IMB-FCM组与相应的外周血/骨髓直接FCM组检测瘤细胞的比值及CMCs的阳性率。结果(1)初发及复发组和PR组的CMCs阳性检出率分别为71.4%、64.5%,两组中CMCs与MMCs比例均呈正相关(P<0.05);MMCs和CMCs比例在初发及复发、PR、CR组中依次降低(P<0.0083)。MMCs和CMCs在CR组及对照组中均未检测出。(2)与CMCs阴性组相比,CMCs阳性组的β2-MG升高、中度以上贫血、sCrea升高、肾功能异常及骨质破坏的频率明显升高,呈现出较高的DS、ISS分期(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,β2-MG升高、中度以上贫血是CMCs存在的独立风险因子(P<0.05)。(3)在每个模拟浓度点CD38/CD138-IMB-FCM组检测U266细胞的比例均分别显著高于相应的直接FCM组(P<0.05),直接FCM、IMB-FCM检测U266细胞的敏感度分别为0.01%、0.001%。(4)瘤细胞比值在骨髓直接FCM组分别显著高于外周血CD38/CD138-IMB-FCM组,在外周血CD38/CD138-IMB-FCM组分别显著高于相应的外周血-直接FCM组(P<0.0167);CD38/CD138-IMB-FCM组检测CMCs阳性率(90.6%,87.5%)分别显著高于相应的直接FCM组(65.6%)(P<0.05)。结论(1)CMCs可反映MM患者的肿瘤负荷及病情进展;相比MMCs,检测CMCs某种程度可以替代反复抽取骨髓检测,提高患者依从性。β2-MG升高和中度以上贫血是CMCs存在的独立风险因子。(2)IMB-FCM能提高CMCs的阳性检出率,敏感度比FCM高10倍。