目的:长链非编码RNA（long noncoding RNA,lncRNA）在表观遗传、转录和转录后水平等多个层面在肿瘤细胞的发生发展过程中发挥着重要的作用。因此探讨lnc RNA对肿瘤的调控作用及机制,对于筛选肿瘤个体化诊断、治疗新靶点具有重要意义。HOX转录反义RNA（HOX transcript antisense RNA,HOTAIR）是一个反义基因间长链非编码RNA,通过募集PRC2复合体沉默靶基因影响了肿瘤转移等生物学行为,但HOTAIR与口腔鳞癌的关系尚不明确。本研究探讨HOTAIR在口腔鳞癌中的表达及其与临床病理学参数和预后的关系,在此基础之上通过体外实验研究其对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡、侵袭转移等过程的影响并进一步研究其通过调控上皮间质转化（epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）促进肿瘤转移的分子机制并通过体内实验进行验证,并探讨针对HOTAIR靶向治疗的体内抗肿瘤活性。方法:1.收集天津医科大学肿瘤医院口腔鳞癌组织及相对应癌旁组织标本76例,应用real-time PCR的方法检测组织标本中HOTAIR的表达情况。分析其在口腔鳞癌组织中的表达情况及其与淋巴结转移等临床病理学参数之间的关系,并进一步评估其与预后的相关性。2.体外实验验证HOTAIR与口腔鳞癌细胞生物学行为的关系。选出高表达HOTAIR的细胞系,并应用si RNA技术干扰细胞系HOTAIR的表达,应用MTT检测HOTAIR对肿瘤细胞增殖的影响,应用平板克隆实验检测HOTAIR对细胞克隆形成能力的影响,应用流式细胞术检测HOTAIR对细胞凋亡的影响,应用划痕试验和Transwell实验检测HOTAIR对侵袭迁徙能力的影响。3.我们对HOTAIR调控口腔鳞癌细胞侵袭转移的机制进行研究,首先利用real-time PCR和Western blot等技术分析细胞系中HOTAIR与EMT相关指标的关系并找到HOTAIR可能调控EMT的指标E-cadherin,接下来我们应用real-time PCR和Western blot等技术在口腔鳞癌组织及细胞系验证HO TAIR与E-cadherin的相关性。进一步应用si RNA干扰、Western blot等技术推测HOTAIR、H3K27me3与E-cadherin的关系。最后应用Ch IP技术检测干扰HOTAIR表达后,对EZH2及H3K27me3与E-cadherin直接结合能力的影响。4.建立口腔鳞癌移植瘤模型,观察移植瘤的生长、转移等情况,并应用real-timePCR技术和免疫组织化学方法检测移植瘤中HOTAIR、H3K27me3及E-cadherin表达的相关性。结果:1.HOTAIR在口腔鳞癌组织中的表达显著高于癌旁组织（p<0.01）。HOTAIR的表达与组织学分级、分期以及淋巴结转移显著相关（p<0.05）。而与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置以及烟酒嗜好无显著相关性（p>0.05）。HOTAIR低表达组的无病生存率（DFS）和总体生存率（OS）显著优于HOTAIR高表达组。2.选出高表达HOTAIR的口腔鳞癌细胞系Tca8113和TSCCA,并能用si RNA技术有效地干扰细胞中HOTAIR的表达水平。干扰Tca8113和TSCCA细胞中HOTAIR的表达后,细胞增殖能力及克隆形成能力显著下降,细胞凋亡显著增加,细胞的侵袭迁移能力显著受到抑制。3.在口腔鳞癌细胞系中,HOTAIR的表达与EMT相关指标具有显著相关性。在口腔鳞癌组织中HOTAIR与E-cadherin表达负性相关,干扰Tca8113和TSCCA细胞中HOTAIR的表达后,E-cadherin表达上升,同时H3K27me3水平降低。干扰Tca8113和TSCCA细胞中EZH2的表达,E-cadherin表达上升。Ch IP结果显示HOTAIR影响了EZH2和H3K27me3与E-cadherin启动子序列的直接结合。4.建立裸鼠移植瘤模型,si HOTAIR组的肿瘤生长速度、移植瘤大小及淋巴结转移率显著低于NC组。与NC组相比,实验组的HOTAIR、H3K27me3水平下降,而E-cadherin表达水平上升。结论:1.HOTAIR高表达于口腔鳞癌中,且与转移密切相关,是预后不良的指标。2.干扰HOTAIR后,影响了口腔鳞癌的发生发展过程,是口腔鳞癌细胞的恶性表型。3.HOTAIR通过募集EZH2,甲基化H3K27,抑制了E-cadherin的表达,启动了EMT过程促进肿瘤的转移。4.体内实验证实抑制HOTAIR相关信号通路可有效抑制肿瘤的转移,可能作为抑制口腔鳞癌转移治疗的新靶点。