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分子印迹的概念来源于人们对抗体-抗原及酶-底物的专一性的认识,著名的诺贝尔奖获得者Pauling 最早提出以抗原为模板来合成抗体的设想。在分子印迹法尚未得到应用之前,化学家们已熟悉所谓的模板效应。当某些分子加到反应混合物内,可使化学反应加速,同时反应产物的分布也会发生明显的变化。然而,真正的分子印迹方法则是在Wuff、shea、Mosbach 以及一些其他研究工作者先驱性工作的基础上发展起来,直至今日的普遍化程度。
分子印迹技术有三要素:第一、在功能单体和模板分子之间制备出共价配合物,或形成非共价的加成产物。第二、对这种单体-模板配合物(或加成物)进行聚合。第三、然后,将模板分子从聚合物中除去。分子印迹的方法十分简单,工作中需要的原料有:功能单体,模板,溶剂及交联剂等。由于MIP(分子印迹聚合物)具有预定性、识别性和实用性等特点,在对映体和异构体的分离、固相萃取、化学仿生传感器、模拟酶催化、临床药物分析和膜分离技术等领域展现了良好的应用前景。
本论文以分子印迹理论为指导,以不同的溶剂合成了不同的分子印迹聚合物,着重研究了分子印迹聚合物的几个方面:
(1) 以槲皮素为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸脂为交联剂,四氢呋喃为溶剂印迹聚合物,并通过固相萃取柱研究了聚合物对木犀草素的选择性能。结果表明当模板分子、功能单体及交联剂的摩尔比为1:7:40时所得到的印迹聚合物效果较好。研究了该分子印迹聚合物对槲皮素和芦丁的薄层层析,MIP 能够将样品中的芦丁和槲皮素分离开,分离因子k=1.79,而NMIP 无法将其分离开。
(2) 以木犀草素为模板、丙烯酰胺为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸脂为交联剂,用本体聚合法制备了木犀草素分子印迹聚合物,对其聚合机理进行了讨论,并进行Scatchard分析,测定木犀草素及其结构类似物的静态分配系数以及聚合物对花生壳提取物的选择性能。由于该分子印迹聚合物对模板分子具有高度选择性和识别能力,把木犀草素分子印迹聚合物用于固相萃取花生壳提取物,分离富集其中的木犀草素活性成分,获得了满意的效果。该分子印迹聚合物通过特异的氢键作用力对模板分子进行识别,静态分配系数为108,对结构类似物槲皮素分离因子为2.07。该分子印迹聚合物对木犀草素离解常数KD 为24.7 μmol/L,最大表观结合量Qmax 为4.80 μmol/g。