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前言 胰岛移植是治疗糖尿病的有效手段之一。胰岛移植安全、可靠,并发症少,它不仅可以有效降低血糖,而且可以减缓、防止甚至逆转糖尿病慢性血管病变,在很大程度上改善病人依靠胰岛素治疗不能纠正的免疫缺损状况。但是移植后急性排斥反应严重影响移植胰岛的功能,如何预防和控制排斥反应的发生、发展,仍是亟待解决的问题。趋化因子是一类控制免疫细胞定向迁移的细胞因子,对白细胞的发育、分化、定位具有重要的调节作用。研究显示趋化因子及其受体介导的细胞免疫在急性排斥反应中具有重要作用。肽核酸是一种核酸类似物,它是由2氨基乙基甘氨酸蛋白骨架取代核酸的磷酸戊糖,可以高度特异地与所选基因序列的靶点结合。肽核酸能高亲和性、高特异性地与DNA或RNA杂交形成稳定双螺旋或三螺旋结构。本实验拟应用反义肽核酸阻断CC趋化因子受体5(CCR5)和CXC趋化因子受体3(CXCR3)作用途径,研究其对同种异体胰岛移植急性排斥反应的影响及其作用机制。 材料和方法 实验动物采用昆明小鼠(沈阳药科大学动物中心提供)作为供体,体重(30±2)g,雌雄不限,受者为C57小鼠,体重(30±2)g。 糖尿病小鼠模型制备:移植前14天,采用链脲霉素化学灼伤法制备糖尿病小鼠模型(腹腔内注射2%STZ,150mg/kg体重)。监测随机血糖,如连续3天在非禁食情况下,血糖>16.8mmol/L,即为糖尿病模型。 胰岛分离纯化:采用明尼苏达大学改良方法,原位灌注消化、密度梯度分离纯化胰岛。应用含冷却的胶原酶(胶原酶V型,1.5mg/ml)的Hank’s