人胚胎视网膜干细胞的体外培养和诱导分化

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该研究从16-19周人胚胎视网膜神经感觉层组织中获得单细胞悬液,在体外进行无血清培养使之增殖,并在加用bFGF、EGF的有血清条件下诱导,使之在体外分化.在无血清培养条件下,细胞在体外可大量增殖,至少可传至8代,说明该细胞具有自我复制能力.用免疫荧光法对其表面标志物进行鉴定,发现诱导前细胞处于未分化状态,表达神经外胚层干细胞标志物nestin;诱导后细胞在不同条件下可以表达视网膜终末细胞标志物,包括PKCα(双极细胞标志物)、GFAP(Müller细胞标志物)、Thy1(节细胞标志物)、rhodopin(视杆细胞标志物)和syntaxin(无长突细胞标志物),同时,其中少数细胞仍然表达nestin,说明该细胞具有多向分化能力.结论:在16-19周人胚胎视网膜神经感觉层中存在具有自我更新能力和多分化潜能的细胞;该细胞可以在体外培养、可以定向诱导向视网膜神经元方向分化、表达视网膜神经元的标志物,为临床干细胞移植治疗视网膜疾病提供了全新的思路.
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