目的：观察不同浓度雌激素、孕激素对体外培养的破骨细胞增殖分化的影响。方法：无菌取出新生奶牛的股骨用机械分离酶消化结合法获取破骨细胞，进行培养，通过形态学观察、Giemsa染色、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色鉴定后作为试验模型，将用含10％胎牛血清的DMEM培养液配制的不同浓度的雌激素、孕激素与破骨细胞共同培养，采用MTT法观察雌激素、孕激素对破骨细胞增殖功能的影响（用波长450处OD值表示）及奶牛破骨细胞的生长曲线，用抗酒石酸酸性磷酸酶测试盒测定雌激素、孕激素对破骨细胞分化的影响（用抗酒石酸酸性磷酸酶活性表示）。结果：采用机械分离酶消化结合法获得的细胞具有典型破骨细胞的形态特征，细胞经抗酒石酸酸性磷酸酶染色呈阳性且阳性率达92％，Giemsa染色有空泡显示，符合破骨细胞的生物学特性，表明培养的细胞为高纯度的破骨细胞。加雌激素、孕激素培养后测定细胞增殖结果显示：不同浓度的雌激素、孕激素均能抑制破骨细胞的增殖。在10^-9mol／L-10^-5mol／L雌激素、孕激素浓度范围内的抑制作用呈现剂量-效应关系，与对照组相比，10^-9mol／L-10^-8mol／L雌激素试验组可抑制破骨细胞破骨细胞增殖，但与对照组差异不显著（P＞0.05），10^-7mol／L-10^-5mol／L雌激素试验组与对照组比较均有极显著性差异（P＜0.01），以10^-7mol／L试验组最为显著（P＜0.01）；10^-9mol／L-0^-7mol／L孕激素试验组可抑制破骨细胞增殖，但与对照组差异不显著（P＞0.05），10^-6mol／L-10^-5mol／L孕激素试验组与对照组比较均有极显著性差异（P＜0.01），以10^-6mol／L试验组最为显著（P＜0.01）；10^-9mol／L-10^-5mol／L雌激素和孕激素混合组与对照组相比，10^-9mol／L-10^-8mol／L雌激素、孕激素混合试验组差异不显著（P＞0.05），10^-7mol／L-10^-5mol／L雌激素、孕激素混合试验组与对照组比较均有极显著性差异（P＜0.01），以10^-7mol几试验组最为显著（P＜0.01）；结果显示孕激素对雌激素有协同促进作用。雌激素、孕激素对奶牛破骨细胞的抑制增殖作用还存在时间-效应关系，随着时间的延长，吸光度值下降，至第7d，吸光度值最低，到第8d，吸光度值有所上升。不同浓度的雌激素、孕激素均能抑制破骨细胞的分化，但与对照组比较差异不明显（P＞0.05）。结论：雌激素、孕激素能抑制体外培养的破骨细胞增殖，且存在剂量-效应和时间-效应关系；孕激素对雌激素有协同促进作用；雌激素、孕激素均能抑制破骨细胞分化。雌激素、孕激素通过抑制体外培养的破骨细胞增殖及分化，从而抑制骨吸收。