整合素是一类由αβ亚基组成的异二聚体细胞黏附分子，主要介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质之间的相互黏附，参与细胞与细胞外基质之间的双向信号传导。整合素广泛分布于细胞表面并被证实为大量病毒的受体或共受体，它的大多数配体分子通过特征性的RGD（Arg-Gly-Asp）模体与之结合。对虾白斑症病毒（WSSV）病是危害中国对虾养殖业健康发展的主要疾病之一，前期研究表明WSSV多个含有RGD模体的囊膜蛋白与WSSV的感染相关。因此，整合素可能是WSSV潜在的受体蛋白。为了阐明整合素在WSSV感染过程中的潜在作用，探讨整合素和WSSV的相互关系，本论文利用抗中国对虾整合素β亚基（FcβInt）单克隆抗体2C5，结合ELISA和流式细胞术跟踪检测了中国对虾在感染白斑症病毒（WSSV）后血细胞中的FcβInt表达变化情况，流式细胞术结果显示颗粒与半颗粒血细胞上的FcβInt分布丰度显著高于透明细胞，且在感染WSSV后这两种血细胞上的FcβInt丰度发生显著上调，在12h时达到最高值，而透明细胞上的FcβInt丰度未发生显著变化；ELISA结果显示总血细胞中的FcβInt蛋白含量在感染WSSV后同样出现显著上调，在12h时达到最高值；荧光定量PCR检测结果显示中国对虾在感染WSSV后总血细胞中的FcβInt转录水平发生显著上调，且在12h时达到最高值，而血细胞中的WSSV基因组拷贝数则在24h时发生显著升高。同时，对WSSV六个囊膜蛋白进行原核重组表达，VOPBA和Dot blotting检测结果显示VP37、VP110、VP187及重组VP31均具有FcβInt结合活性，而VP26和VP28不具有FcβInt结合活性；阻断ELISA和Dot blotting检测结果显示FcβInt混合单抗（2C5和2C10）对对虾血细胞与WSSV相互结合作用具有一定阻断效果。论文研究结果为论证FcβInt作为WSSV潜在细胞受体提供了数据支撑。具体研究内容和结果如下：（1）抽提中国对虾血细胞总RNA，根据FcβInt的全长基因序列设计引物，克隆FcβInt VWA结构域基因片段，构建了FcβInt VWA结构域融合表达载体pET32a-FcβInt-VWA，转入大肠杆菌后成功表达，应用镍离子螯合亲和层析纯化重组蛋白，最终获得了分子量大小为50kDa的重组蛋白rFcβInt-VWA。（2） Western blotting分析两株杂交瘤细胞株2C5和2C10分泌小鼠抗FcβInt抗体的类型，两株单抗均属于IgM类；将两株杂交瘤细胞株扩大培养，并腹腔注射BALB/c小鼠制备抗FcβInt腹水单抗，并利用优球蛋白沉淀法结合凝胶过滤法进行纯化，纯化后的单抗经SDS-PAGE分析，纯度较高；间接ELISA实验测得腹水单抗2C5和2C10的效价分别为1:6400和1:12800；斑点免疫印迹实验显示，两株单抗特异性地与rFcβInt-VWA结合；间接免疫荧光实验和Western blotting表明单抗2C5能特异性识别一条分子量为120kDa左右中国对虾血细胞蛋白，推测其为FcβInt。通过对单抗的抗体类型、效价和特异性进行分析，选择抗体类型是IgM类、效价高、特异性好的单抗2C5作为检测中国对虾体内FcβInt的探针。（3）对中国对虾进行WSSV肌内注射后,在不同时间点进行取样。以单抗2C5作为探针，利用流式细胞免疫实验和ELISA检测对虾各时间点血细胞内FcβInt的蛋白动态表达变化；同时以特异性引物作为探针，利用实时荧光定量实验检测各时间点细胞内的FcβInt mRNA转录水平和WSSV病毒粒子拷贝数的动态变化。结果显示，中国对虾三种细胞内的FcβIn丰度不同，且在病毒感染后表现出较大差异的应答调节。在半颗粒和颗粒细胞内FcβInt的丰度相对较高，病毒感染后FcβInt在6h开始上调，并在12h达到最高水平，之后在24h降到对照水平；而在透明细胞上FcβInt的丰度相对较底，并在病毒感染后没有显著变化。荧光定量实验测得，病毒感染后，总血细胞中FcβInt mRNA的转录水平在12h达到峰值，为对照组的5.21倍；WSSV病毒粒子拷贝数在18h前维持在较低水平，在24h急剧升高，之后缓慢上升。（4）对WSSV六个囊膜蛋白进行原核重组表达，VOPBA和Dot blotting检测结果显示VP37、VP110、VP187及重组VP31均具有FcβInt结合活性，而VP26和VP28不具有FcβInt结合活性；阻断ELISA和Dot blotting检测结果显示FcβInt混合单抗（2C5和2C10）对对虾血细胞与WSSV相互结合作用具有一定阻断效果。