非小细胞肺癌原发灶和转移淋巴结EGFR蛋白表达丰度对比研究

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背景原发性支气管肺癌为目前全球最常见的恶性肿瘤之一,病死率居恶性肿瘤的首位,其治疗成为人们关注的焦点,但疗效尚不理想。某些患者尽管临床分期相同,但同样的治疗方式其效果差异很大,而且原发灶和相应的转移灶之间对治疗的反应也常常存在很大的不同。这些差异性与肿瘤的分子生物学特性有密切的关系,因此有必要对肺癌的基因特点、分子生物学特征进行深入研究,以便最大程度上优化个体化治疗方案,提高疗效,延长生存期,降低治疗的不良反应。目前分子生物学研究多探讨非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer, NSCLC)患者原发灶中不同分子生物标志物的表达情况,而对原发灶和转移灶之间分子标志物的表达状态的关系研究较少。本研究旨在比较NSCLC患者原发灶与转移淋巴结中EGFR蛋白表达状况以及之间的相互关系,为NSCLC的合理治疗提供依据。目的1.探讨NSCLC原发灶与相应转移淋巴结中EGFR表达丰度的状况。2.比较原发灶与相应转移淋巴结EGFR表达丰度的相关性。3.比较原发灶与相应转移淋巴结EGFR表达丰度与临床病理因素的相关性。方法选取20例病理确诊为NSCLC的患者作为研究对象,其中腺癌10例,鳞癌6例,腺鳞癌2例,大细胞癌2例。应用通用型二步法免疫组化染色,将标本经4μm连续切片,常规脱蜡和水化,用胃蛋白酶消化,3%H2O2封闭,加EGFR单克隆抗体(一抗)4℃过夜;37℃复温,加入通用型IgG抗体-HRP多聚体(PV-6000),37℃恒温反应(中间各步用PBS洗),最后DAB显色,显微镜观察,终止显色。苏木精轻微复染,脱水并透明封片,用光镜观察。对照组设阳性、阴性、和空白对照:用已知阳性表达组织作为阳性对照;以PBS代替一抗作为空白对照。采用SPSS13.0统计软件包处理数据, Kruskal-Wallis H方法分析EGFR蛋白表达与性别、年龄、TNM分期和病理类型的关系,用Spearman方法比较原发灶与转移淋巴结EGFR蛋白表达丰度的相关性,用McNemar方法分别比较原发灶与转移淋巴结EGFR阳性表达率及高表达率的差异。全部统计检测均为双侧。检验水准α=0.05。结果1. EGFR在原发灶和转移淋巴结中都有不同丰度的表达。原发灶中阳性率70%(+~+++),高表达率为60.0%(++~+++),包括弱阳性(+)2例,中度阳性(++)8例,强阳性(+++)4例;转移灶中阳性率为55%(+~+++),高表达率40%(++~+++),包括弱阳性(+)3例,中度阳性(++)4例,强阳性(+++)4例。原发灶与转移淋巴结EGFR阳性表达率及高表达率的差异均无统计学意义(P值分别为0.508和0.289)。2.原发灶EGFR表达丰度与病理类型有关(P=0.018),其中腺癌EGFR表达丰度与鳞癌表达丰度差异有统计学意义,P=0.003;而转移淋巴结EGFR表达丰度与病理类型无关,P=0.720。原发灶、转移淋巴结中EGFR的表达丰度与性别、年龄和TNM分期无关。原发灶/转移灶EGFR表达分别为阳/阳,阴/阴,阳/阴,阴/阳比较,与性别、年龄、病理类型和临床分期也无关(P>0.05)。3.原发灶和转移淋巴结中EGFR蛋白表达丰度没有相关性,P=0.194。结论1. NSCLC原发灶和转移淋巴结均有较高的EGFR表达率。原发灶与转移淋巴结EGFR的阳性表达率和高表达率均无显著差异(分别为70%vs55%;60%vs40%)。2. NSCLC原发灶与转移淋巴结的EGFR阳性表达丰度无相关性,所以EGFR蛋白表达状况不能用转移淋巴结取代原发灶。3.原发灶EGFR表达丰度与病理类型有关(P<0.05),说明EGFR的表达丰度受病理类型的影响。
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