本研究以生长慢的二花脸猪和生长快的大白猪为实验模型，采用Northern杂交和RT-PCR方法，对出生后（0、3、20、30、45、90、120、180日龄）垂体中GH mRNA水平的发育性变化进行系统的比较研究。此外，采用RT-PCR方法对猪垂体中GHR和IGF-1R的基因表达水平进行定量测定，以初步探讨GH与IGF-1在垂体水平的作用。为进一步研究GH-IGF-1轴与生长的关系，本研究采用RIA方法测定了血液中IGF-1的水平，并将其发育性变化和品种差异与猪生长速度进行相关分析。 本研究包括以下四个部分：一、mRNA定量测定方法的建立和比较 本研究采用美国Ambion RNA公司生产的Quantum RNA classic18S为内标建立了半定量RT-PCR方法以检测垂体GH mRNA，并同时建立定量Northern杂交方法以鉴定RT-PCR方法的准确性和可信度。结果表明，本研究建立的RT-PCR方法灵敏度高，操作快捷方便，结果与Northern杂交结果吻合，可用于定量检测少量的组织样品中低丰度表达的mRNA。二、猪垂体GH mRNA发育性变化的比较研究 大白猪与二花脸猪垂体GH基因表达的发育变化趋势基本一致，出生当天GH基因表达水平最高，第三天都出现下降，尤其在二花脸猪下降显著。整个试验期内大白公猪垂体GH基因表达总体水平显著高于二花脸公猪（P＜0.01），与体重和生长速度相一致。二花脸垂体GH基因表达的性别差异表现在出生当天和90日龄，但趋势正好相反：出生当天公猪显著高于母猪（P＜0.01），而在90日龄母猪又显著高于公猪（P＜0.05）。三、生长激素受体（GHR）与胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF-1R）在垂体的表达 本研究采用定量RT-PCR方法在猪垂体检测到较高丰度的GHR基因的表达，但未发现显著的发育性变化和品种、性别差异。推测GH对其自身基因 徐金先：二花脸猪生长滥瓷基因表达的发育性变化及其与大白猪的比较研究表达的反馈调节位点可能主要在下丘脑。垂体GHR基因的表达可能与GH在垂体的自分泌和／或旁分泌作用有关。 二花脸猪与大白猪垂体 IGF1 基因表达的发育变化模式基本相似，都在出生时最高，之后呈持续下降趋势，至20日龄形成低谷，然后又缓慢上升到90日龄的较高水平，随后又下降。出主后的第一个高峰可能与IGF系统参与垂体本身的发育有关，而第二个高峰正好与猪生长速度的最高峰相吻合。30日龄和go日龄垂体1＊卜IR基因表达大白公猪高于二花脸公猪O功刀5），而18o日龄呈现相反的品种差异，二花脸高于大白猪o功刀1卜二花脸猪垂体IGFIR基因表达的性别差异表现在出生当天、90日龄和180日龄，出生当天和180日龄时公猪垂体＊F1 显著高于母猪o＜0．05卜而在90日龄则正好相反O＜0刀5）。四、二花脸和大白公猪血清中IGFI水平的比较研究 新生二花脸与大自公猪血清中IGFJ含量都较低，随年龄增长而持续上升，到90日龄达到峰值，随后又下降。这一变化趋势与猪的生长曲线相吻合，但与垂体GH基因表达的发育性受化呈相反的趋势。血清IGF上含量呈现显著的品种差异（P＜0．05），大白猪高于二花脸猪，提示1O｝1与生长的密切关系，也提示循环血液中的IGF－1可能作为负反馈因子参与垂体GH基因表达的调节。