采用杂交瘤技术获得了三株分泌抗胰岛素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中编号为INS49F1的抗体亲和性较好,在酶联免疫分析中得到了初步的应用。 研究并建立了不同模式的胰岛素酶联免疫分析方法。采用两株可相互配对的抗胰岛素单克隆抗体,一株包被聚苯乙烯板、一株标记辣根过氧化物酶、生物素,分别建立了胰岛素双位点夹心酶联免疫分析法。其方法学灵敏度为1mIU/L;批内、批间变异系数分别为4.6%～5.5%和13.5%～14.8%;回收率96.6%～110.6%;高浓度胰岛素血清样品系列倍比稀释后测定,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数0.9999;34例健康人血清样品测定值为0.9～7.4mIU/L,该方法与胰岛素放射免疫分析法的相关性方程为y=0.70X-2.22,r=0.957,n=90。采用多抗及酶标二抗的方法对竞争法的包被、标记、反应条件等进行了初步探索。本工作为今后进一步开发胰岛素酶联免疫分析试剂盒奠定了基础。