【目的】通过大样本前瞻性研究分析PRDM14表达和肺癌发生相关性,明确其临床意义,指导肺癌个体化的治疗。的【方法】收集300例病理分期为T1-T2期的非小细胞肺癌组织标本,结合临床病理资料,通过实时定量PCR和焦磷酸测序方法分别检测PRDM14的表达情况,根据其术后的随访资料分析PRDM14的表达对于非小细胞肺癌预后的临床意义。在细胞水平研究PRDM14基因的功能和其参与调控分子机制。并在制备的非小细胞肺癌的动物模型（in vivo）中研究PRDM14的功能。的【结果】1.PRDM14在非小细胞肺癌细胞株及组织中的表达研究首先,我们在m RNA水平利用PCR技术检测了例肺癌肿瘤组织和配对癌旁组织样本PRDM14的表达水平。结果发现,PRDM14在大部分肺癌样本中上调。进一步通过Western blot比较了肺癌组织及其配对正常组织中PRDM14蛋白水平,抗PRDM14抗体的特异性通过对293T细胞异位表达PRDM14的c DNA分析获得,并进行Western blot分析证实。结果表明:PRDM14在40例肺癌样品的蛋白水平均高于对癌旁组织。使用抗PRDM14抗体进行免疫组化证实PRDM14在肺癌肿瘤组织中高表达而在对癌旁组织中低表达,提示PRDM14有可能参与了非小细胞肺癌的发生、发展。2.PRDM14与肺癌患者的关系为了验证PRDM14在肺癌中对肿瘤预后的影响,我们通过免疫组化方法将80例癌跟癌旁组分为PRDM14高表达组和PRDM14低表达组。结果表明:肺癌组中PRDM14表达明显高于癌旁组,肺癌肿瘤组织有32例高表达PRDM14,癌旁对照组有11例高表达PRDM14,提示PRDM14的表达与肿瘤的转移密切相关,并且与患者的预后成正相关。3.干扰和过表达PRDM14对非小细胞肺癌细胞株增殖的影响40配为了研究PRMD14在非小细胞肺癌内的表达情况,我们首先检测5株非小细胞肺癌细胞株（包括H460、H358、H1975、H292、A549）,选取对数期生长的细胞1×105个细胞株,抽取细胞蛋白,运用western blot检测PRDM14的表达水平。然后采用慢病毒转染技术,将3个作用于PRDM m RNA不同位点的sh RNA转染到NCI-H358、NCI-H1975和A549细胞内,72h后检测PRDM14的蛋白水平。结果表明:PRDM14在非小细胞肺癌细胞株内表达较正常支气管上皮细胞显著增加。在NCI-H358、NCI-H1975细胞株里面沉默了PRDM14,在A549细胞过表达了PRDM14,观察到沉默后细胞增殖减少,过表达后细胞增殖增加。4.干扰和过表达PRDM14对非小细胞肺癌细胞株凋亡的影响对NCI-H358和NCI-H1975细胞株转染si RNA（PRDM14 si RNA3）或对照si RNA（sinc）,对A549细胞感染病毒或控制PRDM14表达慢病毒载体（载体）。待si RNA转染或慢病毒感染24小时后,收集细胞。我们通过在NCI-H358、NCIH1975细胞株里面沉默了PRDM14,而在A549细胞过表达了PRDM14从而干扰PRDM14在非小细胞肺癌细胞株的表达水平。结果表明:干扰PRDM14后促进了细胞的凋亡,过表达PRDM14后减少了细胞的凋亡。5.干扰和过表达PRDM14对非小细胞肺癌细胞株迁移和侵袭的影响为研究PRDM14在非小细胞肺癌的侵袭能力中的作用,我们运用Transwell实验检测细胞侵袭能力的差别。结果显示:干扰PRDM14后减少了细胞的迁移,过表达PRDM14后促进了细胞的迁移6.干扰PRDM14抑制体内成瘤在细胞水平,干扰PRDM14明显抑制肺癌细胞珠的增殖、克隆形成、迁移,促进肿瘤凋亡。为了进一步在动物模型水平验证PRDM14对非小细胞肺癌细胞肿瘤形成的影响,我们将干扰的NCI-H358细胞对照组接种至裸鼠后背对应两侧。结果显示:干扰的PRDM14组肿瘤体积明显小于对照组。了和【结论】PRDM14在非小细胞肺癌的发生发展中起到重要作用,PRDM14促进非小细胞肺癌的增殖侵袭及迁徙能力,具有明确临床意义,对于进一步非小细胞肺癌的的靶向分子治疗方面提供了理论依据,对用来指导肺癌个体化的治疗有极佳的参考价值。