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研究目的：观察甲基叔丁基醚(methyl tert-butyl ether, MTBE)能否诱导小鼠成纤维(L929)细胞增殖的毒物兴奋效应(hormesis)及其毒物兴奋效应作用带(hormetic zone),并评价MTBE诱导细胞增殖的hormesis的卫生学意义。研究方法与研究内容：1采用MTT实验观察MTBE对体外培养的小鼠成纤维细胞株(L929细胞)增殖的影响,同时观察MTBE作用于L929细胞能否产生毒物兴奋效应和适应性反应,确定细胞增殖的hormetic zone和适应性反应的剂量范围。2运用苏木素-伊红(HE)染色观察MTBE作用于L929细胞对细胞形态的影响。3运用黄嘌呤氧化酶法检测MTBE对L929细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响。4运用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术检测MTBE对L929细胞DNA的损伤作用。5运用KC1-SDS沉淀法检测MTBE对L929细胞DNA与蛋白质交联程度的影响。研究结果：1 MTT试验中发现当MTBE染毒24h,1.25g/L～5g/L剂量组细胞存活率较空白对照组高,表现出细胞增殖的毒物兴奋效应。但在后面的48h和72h就没有再出现毒物兴奋效应。MTBE染毒24h～72h的IC50范围在20-26g/L,推算动物经口急性染毒LDso为15.52g/kg～17.40g/kg。当MTBE预染毒L929细胞9h和12h后,0.039g/L和0.078g/L预染毒剂量组在大剂量(25g/L)冲击24h后,细胞相对存活率比未预处理组高,表现出细胞增殖的适应性反应。2 HE染色试验中发现大剂量组20g/L染毒12h后即出现细胞凋亡的形态改变,染毒72h后出现坏死的细胞特异性形态改变。而1.25g/L和5g/L剂量组在染毒72h后部分细胞也出现形态的改变。3 SOD活力检测试验中发现,剂量组20g/L在染毒6h后其SOD活力增长率低于空白对照组,而0.312g/L剂量组在染毒9h后其SOD活力增长率高于空白对照组,剂量对数化后与SOD活力增长率进行二次函数的曲线拟合,发现MTBE染毒6h和9h后,都可出现倒U型的曲线。4 SCGE试验中发现MTBE染毒1h后各剂量组(0.078-20g/L)出现DNA损伤,而且DNA的损伤随着剂量的增高而加重,呈剂量-效应关系；MTBE染毒3h后各剂量组细胞DNA损伤较1h时降低；MTBE染毒6h后各剂量组的DNA损伤受到修复,而且5g/L剂量组细胞的DNA损伤较空白对照组小,表现出毒物兴奋效应；MTBE染毒9h后各剂量组又出现不同程度的DNA损伤。5 KCl-SDS沉淀法试验中发现MTBE染毒L929细胞1h后,20g/L剂量组的DPC系数较空白对照组低,其它剂量组与空白对照组无差别；MTBE染毒L929细胞3h后,各组的DPC系数与空白对照组均无差别；而MTBE染毒L929细胞6h、9h后,20g/L剂量组的DPC系数较空白对照组高,其它组与空白对照组无差别。结论：1 MTT法用于检测细胞增殖hormesis具有一定的可行性。2 MTBE能诱导L929细胞产生细胞增殖和DNA损伤修复的hormesis,并且都具有时效性。两个检测指标的hormetic zone有重叠部分,都包含5g/L,提示细胞增殖的hormesis与DNA损伤修复的hormesis存在密切联系。3 MTBE诱导L929细胞增殖的hormetic zone并非是安全的剂量范围。在这剂量范围染毒1h细胞即出现DNA的损伤作用,虽然在染毒6hDNA损伤进行了修复,但这修复是不完全的,继续染毒9h细胞又出现不同程度的DNA损伤；在hormetic zone更低的剂量下染毒细胞9h细胞已经受到氧化损伤；而且用hormetic zone的剂量染毒72h细胞发生了形态上的改变。4 MTBE能诱导L929细胞产生细胞增殖的适应性反应,具有时效性,在这剂量范围染毒9h未见细胞出现氧化损伤,染毒72h未见细胞形态发生改变,但其剂量范围MTBE的安全性需进一步实验证明。5利用MTT法检测细胞毒性IC50来预测经口急性毒性LDso需进一步考证。