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目的研究GPI锚固蛋白CD59与Cbp在细胞上的定位及在T细胞信号转导通路中的相互作用,以探讨CD59向T细胞内传递信号的相关机制。方法应用细胞免疫荧光技术,通过激光共聚焦荧光显微镜系统对CD59、Cbp的定位进行了分析。利用RNA干扰技术,设计针对Cbp基因的寡核营酸序列,克隆至线性化的pSUPER载体中构建pSUPER-siCbp重组质粒并进行鉴定。采用电转染方法转染Jurkat细胞,荧光显微镜观察GFP基因表达,并行RT-PCR和western blot检测转染细胞中Cbp的表达。将(?)DSUPER-siCbp、pEGFP-N3-Cbp、突变型pEGFP-N3-Cbp三种质粒进行扩增并酶切鉴定,同样转染Jurkat细胞,检测各转染组Cbp蛋白的表达。CD59mAb交联刺激细胞后,western blot检测各组Csk、p-ZAP-70和p-Fyn表达量；MTT检测细胞增殖；ELISA检测细胞上清中自介素2(IL-2)的水平。结果激光共聚焦结果显示：细胞静止时,Cbp分子点状聚集于膜上,CD59分子广泛分布；随着细胞活化,Cbp少量的散在分布,而CD59表达增多并点状聚集。pSUPER-siCbp重组质粒经菌液PCR、 DNA PCR、限制性内切酶双酶切分析和DNA测序鉴定正确。各转染组可表达绿色荧光蛋自,转染J2-pSUPER-siCbp重组质粒的Jurkat细胞中Cbp基因表达量明显低于其他各组。选取J2组质粒进行后续检测结果：与未转染组比较,在基因与蛋白水平,干扰组Cbp表达减少,而高表达组和突变组Cbp表达增加。CD59mAb交联刺激细胞后,与未转染组比较,干扰组和突变组细胞增殖快,IL-2分泌增多,Csk、p-ZAP-70和p-Fyn增多,突变组变化更明显；高表达组细胞则与之相反。结论CD59可借助棕榈酰基团使Cbp分子磷酸化,向细胞内传递抑制信号,引起细胞内相关分子的一系列变化,为探讨CD59与Cbp在T细胞信号转导通路中相互作用及CD59GP(?)胞内信号转导机制奠定基础。