水稻叶绿体发育相关基因TSC-1的调控与功能分析

来源 :上海师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunray_redtide
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随着水稻基因组测序工作的完成以及现代植物分子生物学技术的迅猛发展,作为单子叶模式植物的水稻也日渐受到越来越多的研究者的青睐。本研究主要从转录和翻译水平对基因TSC-1的功能进行了初步分析,研究结果主要有以下几点:
  1.叶绿体超微结构观察表明:20℃时突变体tsc-1的叶绿体发育严重不良,数量极少,而且几乎观察不到类囊体的片层结构,但在32℃时突变体tsc-1的叶绿体结构发育正常。
  2.应用生物信息学的方法发现,基因TSC-1存在2种mRNA,其对应的cDNA编号为AK060637和AK069123,分别将其命名为OsTras和OsTral。同时亚细胞定位通过亚细胞定位网站预测发现,OsTras和OsTral编码的蛋白均定位在叶绿体上。
  3.在转录水平上对TSC-1基因与叶绿素合成及叶绿体发育相关基因的表达检测结果显示:TSC-1基因突变后会引起一些与叶绿素合成以及叶绿体发育相关基因的表达发生变化。
  4.构建了两个全长cDNA互补载体,不仅用分别含有两种重组质粒的农杆菌菌液侵染突变体tsc-1的成熟愈伤,还将分别含有两种重组质粒的农杆菌菌液混合侵染突变体tsc-1的成熟愈伤。
  5.我们以烟草细胞作为瞬时转化对象,和以pMon530-GFP为表达载体的亚细胞定位实验结果发现,OsTras和OsTral编码的蛋白均定位在叶绿体上,与生物信息学的预测结果相吻合。
  综上,本研究为该基因后期的进一步研究奠定了基础,同时也为今后深入研究叶绿体的发育过程和叶绿素的合成途径的研究提供了新的理论依据。
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