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目的:婴幼儿血管瘤(Infantile hemangioma,IH)是一种独特的血管良性肿瘤且在婴幼儿中有较高的发病率,在世界范围内大约10%不同种族婴幼儿受影响。关于婴幼儿血管瘤自然转归为脂肪组织及药物治疗后血管瘤组织内部脂肪增多的具体机制尚未形成统一结论。其中,以血管瘤干细胞(Hemangioma stem cells,Hem SCs)作为婴幼儿血管瘤的起源细胞,来研究婴幼儿血管瘤的自然演变过程及最终转归形态成为研究新热点。胰岛素样生长因子-2(IGF-2)作为一种小而有多重功能的多肽,在肿瘤生长及调控各种生物学功能中有重要作用,前期研究证实IGF-2在血管瘤组织中高表达,其是否参与对婴幼儿血管瘤干细胞可塑性的影响,为今后研究提供了新思路。由此,我们大胆推测,IGF-2参与调节血管瘤干细胞增殖及脂肪分化的影响,为进一步揭示婴幼儿血管瘤组织最终转化提供新的研究方向。方法:(1)运用免疫磁珠(CD133)吸附分选技术,选择增殖期草莓状婴幼儿血管瘤组织标本,消化后分选出Hem SCs后进行细胞培养、传代。(2)利用CCK-8法研究不同浓度IGF-2对Hem SCs增殖的影响及时间生长曲线。(3)空白对照组及IGF-2(100 ng/ml)、IGF-2(100 ng/ml)+IGF-1R受体抑制剂(OSI-906,1μM)、IGF-2(100 ng/ml)+PI3K抑制剂(LY294002,10μM)、PI3K抑制剂(LY294002,10μM)组分别处理Hem SCs进行脂肪诱导分化,运用油红O染色方法确定脂滴形成有无及多少。(4)Western blot检测空白对照组及IGF-2(100ng/ml)、IGF-2(100 ng/ml)+IGF-1R受体抑制剂(OSI-906,1μM)、IGF-2(100ng/ml)+PI3K抑制剂(LY294002,10μM)、PI3K抑制剂(LY294002,10μM)各处理组细胞中脂肪转化因子C/EBPα,C/EBPβ,PPARγ,adiponectin及p-AKT、total AKT的表达。同时,检测不同浓度普萘洛尔处理Hem SCs后IGF-2的表达情况。结果:(1)浓度在100-200 ng/ml的IGF-2在体外对Hem SCs增殖有明显促进作用,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞生长曲线,100 ng/ml组IGF-2处理后的细胞在第3-7天时细胞生长明显增加相比于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)不同处理组Hem SCs脂肪诱导分化后油红O染色结果显示:IGF-2组Hem SCs胞质内脂滴大小及数量均明显增加相比于空白对照组;IGF-2+IGF-1R受体抑制剂组、IGF-2+PI3K抑制剂组和PI3K抑制剂组Hem SCs胞质内脂滴数量均明显减少相比于IGF-2组;PI3K抑制剂组Hem SCs胞质内脂滴数量减少相比于空白对照组。(3)Western blot法显示IGF-2组处理后Hem SCs细胞内脂肪转化因子C/EBPα,C/EBPβ,PPARγ和adiponectin表达量均明显增加与空白对照组比较;IGF-2+IGF-1R受体抑制剂组和IGF-2+PI3K抑制剂组处理后Hem SCs内脂肪转化因子C/EBPα,C/EBPβ,PPARγ和adiponectin表达量均明显减少与IGF-2组对比;PI3K抑制剂组处理后Hem SCs内脂肪转化因子C/EBPα,C/EBPβ,PPARγ和adiponectin表达量均明显减少与空白对照组比较。(4)Western blot结果显示IGF-2及IGF-1R受体抑制剂对PI3K通路的影响:IGF-2组处理1h后Hem SCs内AKT磷酸化表达量明显增加与空白对照组比较;IGF-2+IGF-1R受体抑制剂组和IGF-2+PI3K抑制剂组处理1h后Hem SCs内AKT磷酸化表达量明显减少与IGF-2组比较。(5)Western blot结果显示不同浓度的普萘洛尔对Hem SCs内IGF-2表达的影响:25μM,50μM和100μM浓度的普萘洛尔均使IGF-2表达量增加,但是不呈浓度梯度改变。结论:在体外,胰岛素样生长因子2可促进Hem SCs的增殖,促进其向脂肪分化。