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目的：合成适合毕赤酵母表达的乙型肝炎病毒(HBV)e抗原基因，在毕赤酵母中表达出高特异性和高免疫反应性的重组乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)。
方法：采用聚合酶链反应从含HBV全基因序列(adw)的质粒PHBV1中扩增出野生型e基因，在两个不同的位点定向插入酵母表达载体pPICZαA，构建两种重组质粒CZαA-eAg；采取基因搭桥法及Taq酶聚合反应，选用酵母偏爱的同义密码子替换野生型e基因的部分密码子，制备合成e基因(syneAg基因)，在两个不同的位点定向插入pPICZαA酵母表达载体，构建两种重组质粒CZαA-syneAg；SacI消化重组质粒，用电转法将线性化的携带有野生型和合成e基因的四种重组pPICZαA分别转化毕赤酵母菌株GS115，，筛选His+Muts表型转化子，经甲醇诱导表达HBeAg。
结果：酶切电泳及DNA测序证实野生型及合成e基因已正确克隆到表达载体中；聚丙烯酰胺凝胶电泳及ELISA显示HBeAg在毕赤酵母中分泌表达，含CZαA-syneAg的酵母重组子表达量最高，约为63mg/L，培养上清ELISA测定效价1∶81,920，最大吸光度值达2.8；重组HBeAg与乙型肝炎病毒核心抗体间无结合反应。
结论：成功合成了适合毕赤酵母表达系统表达的HBVe基因及构建了pPICZαA-syneAg重组质粒，毕赤酵母表达系统高效分泌表达出与乙型肝炎病毒核心抗原间无交叉抗原性、具有良好免疫反应性的HBeAg。