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目的:RpoE是肠道致病菌中重要的一个sigma因子,能启动许多基因的表达;本研究拟观察伤寒沙门菌响应环境应激时RpoE是否发挥作用以及高渗应激早期RpoE对其他基因表达调节的研究。方法:(1)采用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌rpoE缺陷变异株。根据伤寒沙门菌rpoE基因序列,设计PCR特异性引物,并在引物5′-末端加上需要的酶切位点。扩增rpoE基因上、下游片段,用BglⅡ消化后,定向连接成rpoE基因的缺损性同源性核苷酸片段。将此片段胶回收后导入自