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目的慢性非传染性疾病(Noncommunicablediseases,NCDs)已成为不容忽视的全球性公共卫生问题。改善脂肪组织胰岛素抵抗(Insulinresistance,IR)在NCDs的早期防治中发挥重要的作用。二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)和二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA)对IR的调节作用备受关注,但两者调节脂肪细胞IR是否存在差异尚不明确。本研究探讨DHA和EPA调节脂肪细胞IR的作用差异和剂量效应关系。研究结果可为NCDs的早期防治提供新思路和科学依据。方法3T3-L1前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞后,使用5、10、15、20ng/mL TNF-α处理脂肪细胞48h。GOD-POD法测定糖摄取量,Real-time PCR和Western blot测定胰岛素信号通路关键分子,确定TNF-α诱导脂肪细胞IR的最佳浓度。不同浓度DHA或EPA(25、50、100、200、400μmol/L)处理IR脂肪细胞24h,BSA处理作为对照组。MTT法测定细胞活性,GOD-POD法测定细胞糖摄取量,油红O染色定量测定胞内TG含量,TBA法测定胞外MDA含量。Real-time PCR测定 SREBP-1c、ACC、FAS、HSL、ATGL mRNA 表达。PCR 测定脂联素和瘦素mRNA表达,ELISA测定细胞培养液脂联素和瘦素含量。Real-time PCR 测定 IRS1、PI3K、Akt、GLUT4、GPR120、PPARγ mRNA 表达,Western blot 测定 IRS1、PI3K、Akt、GLUT4、GPR120、PPARγ 的蛋白表达及 Akt 磷酸化水平。结果10ng/mL TNF-α处理48h可诱导脂肪细胞IR。10ng/mL TNF-α显著降低脂肪细胞胰岛素刺激糖摄取量。同时,降低IRS1、PI3K、Akt、GLUT4 mRNA表达,降低IRS1、PI3K、GLUT4蛋白表达以及抑制Akt磷酸化。各浓度DHA和EPA均无明显细胞毒性。100、200μmol/LDHA和EPA均可显著改善IR脂肪细胞糖摄取能力。浓度为20μmol/L时,DHA效果强于EPA。400μmol/L DHA和EPA显著增加胞外MDA含量。各浓度DHA和EPA均显著提高胞内TG含量。DHA较EPA更有利于上调脂质合成基因的表达。除400μmol/L EPA外,各浓度DHA和EPA均可显著降低HSL mRNA表达。200、400μmol/L DHA显著增加脂肪细胞脂联素mRNA表达和分泌,且效果强于EPA。除25μmol/L DHA和EPA外,各浓度处理均可降低脂肪细胞瘦素mRNA表达和分泌。DHA和EPA可通过调节IRS1/PI3K/Akt/GLUT4信号通路改善脂肪细胞IR。DHA和EPA均可调节PPARγ表达。仅100、200μmol/L DHA可增加GPR120 mRNA和蛋白表达,EPA无此效应。结论1.100μmol/L和200μmol/L DHA、EPA改善IR脂肪细胞糖摄取能力效果最为显著。浓度为200μmol/L时,DHA效果强于EPA。2.DHA和EPA调节脂肪细胞IR的作用及差异表现在:①DHA促进脂质合成作用强于EPA;②200、400μmol/LDHA增加脂联素表达和分泌作用强于EPA;③DHA和EPA均可通过调节IRS1/PI3K/Akt/GLUT4信号通路改善脂肪细胞IR,DHA的作用更强;④DHA可能通过GPR120/PPARγ改善脂肪细胞IR,EPA可调节PPARγ表达,而对GPR120的蛋白表达无显著影响。