第一部分钠通道亚型Nav1.1在豚鼠心室肌细胞中的表达目的:用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察成年豚鼠心室肌细胞Nav1.1的表达。方法:采用Langendorff系统灌流离体豚鼠心脏,酶消化法分离豚鼠心脏成单个心肌细胞。分离的心肌细胞被随机分为3组:对照组、抗体组、抗体+triton组。应用免疫荧光技术对心室肌细胞进行标记,激光扫描共聚焦显微镜观察Nav1.1在心室肌细胞上的表达。结果:激光扫描共聚焦显微镜观察的结果显示:抗体组的心室肌细胞膜上见荧光分布;抗体+triton组心室肌细胞膜上和细胞内均可见荧光分布,细胞内两处荧光尤为明显。结论:Nav1.1在成年豚鼠心室肌细胞膜上及细胞内均有表达。第二部分Nav1.1抗体对豚鼠心室肌细胞钠电流的影响目的:探讨Nav1.1抗体对成年豚鼠心室肌细胞钠电流的影响。方法:采用Langendorff方法灌流离体豚鼠心脏,酶消化法分离豚鼠单个心室肌细胞。将分离的心室肌细胞随机分为4组,即对照组、1:100抗体组、1:50抗体组、1:25抗体组。采用全细胞膜片钳技术,观察分离豚鼠心室肌细胞在用药前及不同浓度(1:100,1:50,1:25)Nav1.1抗体作用后心肌细胞钠电流的变化。结果:在Nav1.1抗体作用下,钠离子通道电流密度呈浓度依赖性减小。用药前与三个抗体组(1:100,1:50,1:25)的电流密度分别为34.22±6.22pA/pF、32.13±3.45pA/pF、25.49±7.4pA/pF、19.23±1.69pA/pF。其中1:25Nav1.1抗体明显降低钠电流密度(p<0.05),并且,1:25Nav1.1抗体使INa I-V曲线明显向正电位方向移动。结论:Nav1.1抗体对成年豚鼠心室肌细胞钠电流有抑制作用。