罗格列酮逆转人胃癌裸鼠移植瘤对丝裂霉素耐药的作用及机制

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目的观察PPARγ激动剂罗格列酮(ROS)能否逆转人胃癌SGC7901/VCR细胞裸鼠移植瘤对丝裂霉素(MMC)的耐药作用,初步探讨ROS在体内逆转人胃癌SGC7901/VCR细胞多药耐药相关的可能机制。方法将人胃癌SGC7901/VCR细胞收集后接种于裸鼠背部皮下,观察移植后裸鼠的成瘤情况,筛选成瘤的裸鼠。术后两周将成瘤的裸鼠随机分为六组:空白对照组生理盐水0.2ml.2d-1(A组)、丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1组(B组)、罗格列酮100mg.kg-1.2d-1组(C组)、罗格列酮50mg.kg-1.2d-1+丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1 ( D组)、罗格列酮100mg.kg-1.2d-1+丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1(E组)、环孢霉素50mg.kg-1.2d-1+丝裂霉素2.5mg.kg-1.2d-1(F组)。每组8只裸鼠;待移植瘤长至大小约100mm3时开始分别给每组裸鼠灌胃给药(均为每两日一次),其中丝裂霉素腹腔注射给药,生理盐水、罗格列酮、环孢霉素灌胃。每隔5日分别测量每只裸鼠移植瘤的大小并给裸鼠称重,并据此绘制移植瘤的生长曲线;第40天后处死荷瘤裸鼠,检测各组移植瘤的大小、重量,计算抑瘤率;HE染色观察移植瘤的组织形态;Real -Time PCR检测MDR1、MRP、Livin、MGr1-Ag mRNA表达;免疫组化和Western-blot检测P-gp、MRP、MGr1-Ag蛋白的表达。结果1、裸鼠体重:处死前各组裸鼠体重差别无统计学意义(P>0.05);2、用药后对移植瘤体积的影响:A组、B组移植瘤瘤体积差别无统计学意义(P>0.05),C组、D组、E组、F组与A组、B组比较移植瘤瘤体积差别有统计学意义(P<0.05),以E组、F组移植瘤瘤体积最小;3、用药后对移植瘤组织MDR1、MRP、Livin、MGr1-Ag mRNA表达的影响: A组、B组MDR1、MGr1-Ag mRNA表达最强,C组、D组、E组、F组与A组和B组比较差异有统计学意义(P<0.05),E组、F组表达最少,组间差异无统计学意义(P>0.05);MRP mRNA以B组最高,A组、C组、D组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05),E组、F组依次减少、差别有统计学意义(P<0.05);Livin mRNA A组与B组比较差异无显著性(P>0.05),C组、D组、E组、F组与A组、B组比较差别有统计学意义(P<0.05);4、用药后对移植瘤组织P-gp、MRP、MGr1-Ag蛋白表达的影响: A组、B组P-gp、MGr1-Ag蛋白表达最强,C组、D组、E组、F组与A组和B组比较差异有显著性(P<0.05),E组、F组表达最少,组间差异无统计学意义(P>0.05); MRP以B组最高,A组、C组、D组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05),E组、F组依次减少、差别有统计学意义(P<0.05)。结论1、罗格列酮可抑制人胃癌SGC7901/VCR细胞祼鼠移植瘤瘤体生长;2、罗格列酮可部分逆转人胃癌SGC7901/VCR细胞祼鼠移植瘤对丝裂霉素的耐药性;3、罗格列酮在体内部分逆转SGC7901/VCR细胞祼鼠移植瘤多药耐药的重要机制可能是通过下调MDR1、MGr1-Ag基因及其编码的蛋白和Livin基因在裸鼠移植瘤组织中的表达。
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