岛叶GABAB2R在匹罗卡品致痫大鼠再认记忆功能损害中的作用

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目的研究岛叶GABAB2R在匹罗卡品致痫大鼠再认记忆功能损害中的作用,深入了解岛叶在大脑认知功能中的作用。方法建立氯化锂-匹罗卡品致痫模型,恢复一周后,随机分成岛叶组、嗅周皮质组、海马组,溶媒对照组及正常对照组共七组,每组10只。(1)岛叶组:立体定位下于岛叶颗粒细胞区注射沉默GABAB2R受体的腺相关病毒颗粒;(2)嗅周皮质组:嗅周皮质区注射沉默GABAB2R受体的腺相关病毒颗粒;(3)海马组:海马CA1区注射沉默GABAB2R受体的腺相关病毒颗粒;(4)溶媒对照组:以上三个靶结构区注射腺相关病毒空载体颗粒;(5)正常对照组:注射与腺相关病毒同等体积的生理盐水。实验中,大鼠Intelli Cage全自动智能监测系统可以实时监控大鼠。通过自由探索、位置学习和位置转换学习等学习模块,监测大鼠的再认记忆功能。行为学监测实验后取出各组大鼠大脑,每组取出一部分整体大脑用于制作冰冻切片,进行荧光免疫的实验;将岛叶组织、嗅周皮质组织和海马组织从剩余的大鼠大脑中取出,用于蛋白质免疫印迹实验。Western-blot检测GABAB2R蛋白表达情况。荧光免疫鉴定GAB AB2R s i R NA腺相关病毒在致痫大鼠各脑区的转染。采用均数±标准差(X±S)来表示实验数据,运用完全随机设计方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)行为学检测:岛叶组的鼻触次数和访问次数均高于其溶媒对照组(P均<0.05);岛叶组SD大鼠的鼻触次数及其访问次数均高于正常对照组(P均<0.0 5);嗅周皮质组的鼻触次数和访问次数均高于其溶媒对照组和正常对照组(P均<0.05);海马组的鼻触次数和访问次数均高于其溶媒对照组和正常对照组(P均<0.05)。(2)免疫印迹试验检测:GABAB2R蛋白在岛叶组、海马组、嗅周皮质组、岛叶溶媒对照组、海马溶媒对照组、嗅周皮质溶媒对照组和正常对照组的表达含量分别为:0.48±0.06、0.41±0.04、0.45±0.02、1.12±0.05、1.01±0.04、1.21±0.04、1.02±0.09,岛叶组、海马组和嗅周皮质组的GAB AB2R的含量与各自的溶媒对照组相比较均有所降低,具有统计学意义(P均<0.05)。(3)荧光免疫检测:岛叶组、海马组、嗅周皮质组的GABAB2R表达的灰度值均低于正常对照组(P均<0.05)。结论岛叶GABAB2受体活性水平的降低有助于改善致痫大鼠再认记忆功能。岛叶在大脑认知功能中起到重要作用。
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