【摘 要】
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水稻黄单胞菌包含两个致病变种Xanthomonas orzae pv.oryzae(Xoo)和X.oryzae pv.oryzicola(Xooc)，在水稻上分别引起白叶枯病和细菌性条斑病。本研究对水稻黄单胞菌gacA、ppsA
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水稻黄单胞菌包含两个致病变种Xanthomonas orzae pv.oryzae(Xoo)和X.oryzae pv.oryzicola(Xooc)，在水稻上分别引起白叶枯病和细菌性条斑病。本研究对水稻黄单胞菌gacA、ppsA和zur基因进行克隆与鉴定，并对基因进行序列分析。用同源重组的方式构建相应基因的插入突变株，通过与野生型菌株进行表型比较来推知基因相应功能。 (一) 根据已公布基因组的X.axonopodis pv.citri(Xac)和X.campestris pv.campestris(Xcc)的gacA基因序列，设计简并引物GF／GR，采用PCR的方式从Xoo菌株PXO99和Xooc菌株RsGD42染色体中扩增了gacA基因的同源片断。核酸序列分析表明，gacA基因全长648bp，编码215个氨基酸的蛋白。Xoo和Xooc gacA基因只有2个碱基的差别。在与其它种gacA基因比较发现其在Xanthomonas属中是保守的。NCBI网站蛋白保守域搜索结果表明，GacA属于LuxR蛋白家族相似蛋白的一员。其具有一个CheB结构功能域，可能参与调控细菌的趋化性。 以引物XOR1／XOR2扩增gacA基因的内部片断，连接于PMD18-T，获得重组质粒pXOR和pXORs，电击转化质粒于野生型菌株电转感受态细胞中。通过单交叉同源重组的方式将重组质粒整合入基因组染色体中获得突变株。PCR和Southern杂交验证质粒插入的正确性。通过对0.1％Tryptone趋化性的调控来看，突变株较野生型的趋化性有了一定程度的下降。但对其它一些表型的测定结果证明，gacA基因并不是水稻黄单胞菌的全局性调控子。 (二)水稻白叶枯病菌基因组全序列已公布。通过基因组注释发现，Xoo只有一条糖异生路径，也就是苹果酸酶-磷酸烯醇式丙酮酸合成酶途径。本研究通过单交换同源重组的方式构建了磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因(ppsA)的非极性哭变体OSPAM。碳源利用检测显示，野生型菌株PXO99和互补菌株COSPAM能够在以柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、延胡索酸、丙酮酸、甘油或乙酸作为唯一碳源的基本培养基上正常生长，而OSPAM则不能正常生长。说明PPSA途径是PXO99在糖异生过程中从四碳二羧酸合成磷酸烯醇式丙酮酸的唯一途径，这一结果和基因组注释相符。利用剪叶接种法接种感病寄主汕优63，突变体产生的病斑长度明显低于野生型。寄主叶内生长测定结果显示OSPAM的生长比PXO99低一个数量级。这些结果表明糖异生过程是白叶枯病菌致病及在寄主体内生长必需的。 (三)锌吸收调控蛋白(Zur)存在于许多细菌中，当细胞内的锌离子浓度过高
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我的一个朋友，当年写诗，写得很好，后来突然不写了。不写了，去挣钱，六亲不认，只认钱。大概用了十年左右的时间，他挣了许多钱，在北京买房，买车;在海滨城市买房买车;在海岛上买房买车，目前正计划在国外买房买车。因为久未联络，不知道他选择的国家是法国还是德国。 法国浪漫。 而德国，更趋于现实。 大概是二十世纪八十年代的事，那时我们都年轻，只有二十岁多一点，读书，上班，恋爱，憧憬未来，对世间的一切都充
作者简介：刘国芳，1957年生，江西临川人，中国作家协会会员，出版有小小说集 《风铃》 《刘国芳小小说》 等二十余部。 老李家要拆迁了，一个大大的拆字，涂在老李家的墙上。拆字外面，还画了一个圆圈。当然，不仅是老李一家要拆，是整个村子都要拆迁。老李走在村里，看见所有的墙上都涂着那个大大的拆字。 随后，村里就有人搬东西。 老李也搬。 没多久，村里的人都搬走了。 老李再去，看到一个村空空的，没
无题 没有超能力，没有酒钱 门前的小河也依然不自觉地释放神功 不愿流淌，做一场没有路的森林梦 举着没有蓝天的诺言 一挥手，雨落花谢 喜欢你变成一个守夜人的突然 像一杯没有刻度就让人醉过的酒 更像一本剪了翅膀的书 静静地坐在四合院月光的正中 就着斑驳的树影吞掉玫瑰 善良挑亮的灯光剪开森林里每一片叶子 我不会答应你的请求 原谅我只有一点的睡意 和那个躲在茶几下的小橘子 思
在张永民家，我被震撼了。不是因为他，而是因为他的儿子。 在大吕村25个贫困户中，张永民是我比较关注的一家。 第一次见到张永民，我就有点纳闷，年纪轻轻、头脑清楚、四肢健全、活蹦乱跳的小伙子怎么会是一个贫苦户？ 张永民瘦瘦的，中等个子，脸色微黑。2017年中秋节，机关组织全体党员干部到村里慰问贫困户，我们单位财务科长郭爱萍一对一帮扶户就是张永民。我陪着郭爱萍沿着街道拐了好几个弯，一直快到大吕村西
我有一个交往频繁的同学，现在是艾城有名的面包师。当年，一点儿没有显示：我有写小说的天赋，他说有做面包的感觉。 他有名气，不过在业内，再缩小是西餐，再再缩小是一个必须的食品——面包。我笑。我俩合起来，就是两手抓，我是精神的面包，他是物质的面包。我俩相互欣赏，他嫌这样还不够。他确实是所有饭店、专营店制作面包的头块牌子。他不以为然。因为，他期望直接听到顾客赞赏他的面包，可是，他不能跑到餐厅里去吧？那是
早晨四五点，天空的脸还没洗干净，老贵就已经挑着一担水到了地头。他不敢歇息，提着水桶来到田里。玉米已经有五六片叶子了，他看了看，都比昨天多了一片，昨天是四片的，今天五片;昨天五片的，今天六片……他把水瓢对准玉米的根部，缓慢地浇着——如果浇得快了，水流就会把玉米根部那儿的土浇跑了;如果浇得过猛，容易把土溅起来糊到玉米的叶子上。水遇到土壤，转瞬即逝，还是留下了湿漉漉的蛛丝马迹。水流的“嗞嗞”的声音，在老
凤子感觉今天的太阳很大很亮，她用手掌搭在眼睛上方，眯着眼向上看，太阳的光线都是彩色的，一条一条放着耀眼的光，就是小时候学画画时，老师说的那些赤橙黄绿青蓝紫的感觉。 看见了吗？青阳指着马路对面的一片楼群中正在施工的一幢楼房。那是13号楼，我们是14单元520室。凤子就顺着青阳的手看去，那一排排脚手架上都蒙着草绿色的防护网，一座座高大的塔吊正在忙碌的工作。不远处的一座大楼顶上，“封顶大吉”四个红色大
赵大海恒记肉铺坐落于东街自西向东第一家，坐南朝北，一间铺面，卸下手掌厚的木排门，临街一张要数人抬的杂木肉案，黝黑的案板足有半尺厚，整块案板中间低四周高，纵横交错深浅不一的刀痕，仿佛告诉每一个看见的人，这块案板有些年头了。 说起来赵大海的肉铺也算是祖产了，据说他的爷爷就是城东一个走村串户的杀猪佬，他的父亲子承父业，父子两代节衣缩食，到了赵大海出生，才算兑下了这东街转弯的小铺面，行商成了坐商，才有了