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目的:明确同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)表达变化对小鼠成纤维细胞的影响。阐述HIPK2对Wnt/β-catenin信号通路的作用及其调控肺纤维过程可能的机制。探究过表达HIPK2对博来霉素诱导的肺纤维化小鼠纤维化程度及Wnt/β-catenin信号通路活化情况的影响。方法:1.构建有荧光蛋白标记的过表达HIPK2(Ad-HIPK2)、干扰HIPK2(Ad-HIPK2-shRNA)重组腺病毒载体。2.将重组腺病毒转染小鼠肺成纤维细胞株(MLF),用CCK8法、Transwell法、流式细胞术检测各组细胞的增殖、侵袭、凋亡;qPCR和Western blot技术检测HIPK2、β-catenin、CollaⅠ、CollaⅢ、α-SMA的蛋白表达。3.构建博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型,将过表达HIPK2重组腺病毒通过尾静脉注射入小鼠体内,分别于7、14、28三个时间点处死实验小鼠,收集小鼠肺组织标本并固定。采用HE染色、Masson染色、qPCR、Western blot、免疫组化等技术研究HIPK2在小鼠肺纤维化发展中的分子机制。4.采用SPSS 25.0统计软件对实验数据进行统计分析。各组数据以表示,两组间比较采用独立样本t检验。三组间比较采用单因素方差分析及Dunnet事后两两比较。P<0.05时差异有统计学意义。结果:1.体外细胞培养实验中,低表达HIPK2组小鼠肺成纤维细胞增殖增加、侵袭能力增强,凋亡减少,合成与分泌CollaⅠ、CollaⅢ增加,α-SMA表达下调;过表达HIPK2组小鼠肺成纤维细胞增殖减少、侵袭能力减弱,凋亡增加,合成与分泌CollaⅠ、CollaⅢ减少,α-SMA表达下调。2.低表达HIPK2组小鼠肺成纤维细胞β-catenin表达增加,过表达HIPK2组小鼠肺成纤维细胞β-catenin表达减少;低表达HIPK2组加入Wnt/β-catenin通路抑制剂XAV939后合成和分泌CollaⅠ、CollaⅢ减少。3.HIPK2在博来霉素诱导的肺纤维化小鼠中明显低表达。HE染色、Masson染色及Ashcroft评分显示,与空白对照组相比,博来霉素诱导的肺纤维化小鼠模型组中肺组织纤维化程度更重,过表达HIPK2组肺组织纤维化程度较博来霉素小鼠组减轻。过表达HIPK2组肺纤维化小鼠合成与分泌CollaⅠ、CollaⅢ减少,肌成纤维细胞标准物α-SMA表达减少,凋亡因子Bc1-2、caspase3表达增加。博来霉素肺纤维化小鼠肺组织中β-catenin表达增加,过表达HIPK2组肺组织中β-catenin表达减少。结论:1.HIPK2低表达促进肺纤维化的发生,过表达HIPK2可抑制肺纤维化的形成。2.肺纤维化的过程中伴随着Wnt/β-catenin信号通路的活化。3.低表达的HIPK2可能通过刺激Wnt/β-catenin信号通路活化参与肺纤维化的形成,抑制Wnt/β-catenin信号通路后肺纤维化程度减弱。