兔骨髓间充质干细胞穴位与静脉移植对梗死区血管新生的实验研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:MaoZeDongNiMaBi2005
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目的:探讨兔异体骨髓间充质干细胞(MSCs)穴位移植与静脉注射两种移植途径对兔心肌梗死区血管新生的影响。材料与方法:以日本大耳白兔,用开胸结扎冠状动脉前降支的方法建立急性心肌梗死模型,将已建立心肌梗死模型的日本大耳白兔随机分为3组,模型对照组、穴位注射干细胞组、静脉注射干细胞组。1周后穴位注射干细胞组经穴位(至阳、膻中、双侧心俞四穴)注射已经分离、培养、扩增、标记后的MSCs悬液1×l06细胞/穴,静脉注射干细胞组经兔耳缘静脉注射MSCs悬液2×l06细胞/静脉。5周后对梗死区进行Brdu免疫组化染色以观察穴位和静脉注射MSCs是否迁移至梗死区;对Brdu染色阳性的细胞复染心肌特异性肌钙蛋T染色以观察迁移的细胞是否分化及分化的性质;采用免疫组化法检测梗死的心肌组织血小板内皮细胞黏附因子-1(CD31),观察穴位及静脉注射的MSCs对梗死区毛细血管新生影响;免疫组化法检测碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),以明确穴位及静脉注射MSCs后梗死区毛细血管新生的机制;并观察3组兔死亡率。结果:1、穴位及静脉注射MSCs组梗死区组织免疫组化brdu染色阳性,梗死区组织cTnT染色阳性;而模型对照组未见Brdu染色阳性,cTnT染色阳性。2、免疫组化法检测梗死心肌组织中CD31平均光密度值,与正常组相比较,模型对照组、穴位注射干细胞组均降低,P<0.01,静脉注射干细胞组略升高,P>0.05;与穴位注射干细胞组相比较,模型对照组降低,P<0.05,静脉注射干细胞组,P=0.05;与模型组相比较,静脉注射干细胞组升高,P<0.01(附表1及附图11-14)。3、免疫组化法检测梗死心肌组织中BFGF平均光密度值,与正常组相比较,模型对照组、穴位注射干细胞组均升高,P<0.05,静脉注射干细胞组降低,P<0.01;与穴位注射干细胞组相比较,模型对照组降低,P<0.05,静脉注射干细胞组降低,P<0.01;与模型组相比较,静脉注射干细胞组降低,P<0.01(附表1及附图15-22)。结论:1、穴位及静脉注射骨髓间充质干细胞,可迁移至梗死心肌组织中,并可以在梗死心肌组织中分化为类心肌样细胞。2、穴位注射骨髓间充质干细胞和静脉注射骨髓间充质干细胞可使梗死心肌组织中CD31表达上调,使梗死区中毛细血管新生。3、穴位注射骨髓间充质干细胞梗死心肌组织中毛细血管新生机制是穴位注射骨髓间充质干细胞刺激梗死心肌组织中bFGF表达上调。4、穴位注射骨髓间充质干细胞与静脉注射骨髓间充质干细胞对梗死区血管新生情况没有显著差异。
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