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复杂成分的快速、高效分离一直是天然产物研究的一个难点，本文以银杏叶总提取物为研究对象，以聚酰胺×C18模式的全二维制备液相色谱系统为主要分离手段对银杏叶成分进行在线的分离与纯化。 首先，基于聚酰胺在银杏叶成分研究上的成熟应用，本研究将其与分离机理差异较大的C18串联在一起，以中压液相色谱×制备型高效液相色谱(MPLC×prep-HPLC)系统为基础，组成聚酰胺×反相(PA×RPLC)制备型全二维液相色谱系统。通过该串联模式与其他几种常用串联模式正交性的比较，证明了该串联模式的很好正交性。银杏叶总样经过C18初步分离，共分成20％、40％、60％、80％和100％五个组分，通过综合的考察，最终选择了60％组分作为后续在线分离的样品。 然后，在确认了在线制备型全二维液相色谱系统的工作参数后，以构建的系统对60％组分进行实际在线分离。通过该系统一次操作，共制备得到16个单体化合物，其中13个化合物以核磁共振和质谱数据对其结构进行了表征。将该结果与传统一维制备的分离结果比较发现，该系统在获得的化合物数目、纯度和速度方面都远远优于传统方法，显示了很高的分离效率。 最后，以简单的一维制备技术，通过制备条件的优化，对80％组分和100％组分进行制备分离，共得到5个双黄酮化合物。通过在线全二维制备液相色谱和传统一维制备液相色谱，本研究共制备得到21个化合物，其中18个化合物的结构通过核磁共振和质谱手段得以表征。本研究实现了以在线手段快速、高效分离银杏叶中的成分，为将来银杏叶全息图谱的构建和活性成分的研究提供了一定的物质基础。