积雪草苷、二苯乙烯苷提取纯化工艺及何首乌化学成分的研究

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本论文对积雪草有效成分积雪草苷的提取纯化工艺进行了研究。以积雪草苷含量为评价指标,采用L9(34)正交试验优选积雪草苷提取工艺,考察了乙醇浓度、提取方法、提取时间对积雪草苷含量的影响,最佳工艺为95%乙醇回流提取1h。减压回收乙醇,得积雪草苷乙醇提部位,加适量水溶解,以石油醚-乙酸乙酯-正丁醇溶剂系统萃取,正丁醇部位减压蒸干,溶于少量甲醇,然后滴加丙酮,析出积雪草苷粗品。积雪草苷粗品经硅胶柱层析纯化,洗脱系统为氯仿-甲醇-水(70:30:3),得到的纯度为90.0%的积雪草苷成品。建立了RP-HPLC法测定积雪草苷提取物中积雪草苷含量,采用zorbax C18柱,乙腈-水(28:72)为流动相,检测波长205nm,结果积雪草苷加样回收率为101.6%,RSD为2.43%。此方法简单、准确,适用于积雪草苷提取物的质量控制。本论文还对何首乌有效成分二苯乙烯苷的提取纯化工艺进行了研究。以二苯乙烯苷转移率为评价指标,采用L9(34)正交试验优选渗漉法提取二苯乙烯苷工艺,考察了水用量、浸泡时间及流速对二苯乙烯苷转移率的影响,结合生产实际确定的最佳工艺为12倍量水渗漏提取,流速为10ml/kg药材/min。采用D101型大孔吸附树脂纯化二苯乙烯苷水提部位,最佳上样量为17mg二苯乙烯苷/ml大孔树脂;最佳洗脱浓度为25%乙醇;5倍量为最佳洗脱用量。采用该工艺纯化二苯乙烯苷,纯度达67.6%。二苯乙烯苷粗品经硅胶柱层析纯化,洗脱系统为氯仿-甲醇-水(200:4:3),得到纯度为92.2%的二苯乙烯苷成品。建立了RP-HPLC法测定二苯乙烯苷提取物中二苯乙烯苷含量,采用HIQ C18柱,乙腈-水(21:79)为流动相,检测波长320nm,结果二苯乙烯苷加样回收率为98.3%,RSD为2.68%。此方法简单、准确,适用于二苯乙烯苷提取物的质量控制。本论文还进行了何首乌干燥块根部位的乙醇提取物有机化学成分研究。实验采用多种现代分离技术(包括硅胶柱层析法,凝胶色谱法等)对何首乌乙酸乙酯提取部位进行分离,从何首乌中分离到17个化学单体,通过1H-NMR,13C-NMR波谱分析方法鉴定了其中4个化合物的结构,分别为大黄素、大黄素-6-乙醚、大黄素-1,6-二甲醚、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷。其余化学单体的结构尚在解析中。
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