榄香烯乳注射液对乳腺癌及血管内皮细胞功能改变及作用机制的体外研究

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:scyscy2001
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目的:通过研究榄香烯乳注射液作用于乳腺癌及血管内皮细胞株功能改变及作用机制的体外研究,观察其对乳腺癌及血管内皮细胞株的生物学行为影响,并检测对“三阴性乳腺癌”细胞MDA-MB-231的凋亡诱导。方法:设立空白对照组,将不同浓度榄香烯乳作用于乳腺癌细胞系MDA-MB-231及MCF-7细胞作为处理组,结晶紫实验检测细胞生长速率,ECIS实验检测细胞粘附功能及迁徙功能,侵袭实验检测细胞侵袭能力。作用于血管内皮细胞系HECV,结晶紫实验检测细胞生长速率,ECIS实验检测细胞粘附功能及迁徙功能,新生血管形成实验检测血管生成能力,细胞聚集实验检测细胞聚集能力。榄香烯乳作用于MDA-MB-231细胞作为处理组,同时设立空白对照组,倒置显微镜观察细胞形态,实时定量PCR检测细胞凋亡指标Caspase3、Caspase8、Caspase9的表达。结果:榄香烯达到一定浓度时,能够有效的抑制MDA-MB-231(浓度≥20μg/mL时,P<0.05)及MCF-7(浓度=160μg/mL时,P<0.05)细胞的生长速率,且呈剂量依赖性;随着榄香烯乳浓度的增加,MDA-MB-231(浓度≥80μg/mL时,P<0.05)及MCF-7(浓度=160μg/mL时,P<0.05)的细胞的粘附能力及MDA-MB-231(浓度≥40μg/mL时,P<0.05)的细胞迁徙能力减低,但对MCF-7细胞的迁徙能力改变不明显;榄香烯浓度为160μg/mL时,MCF-7的侵袭率降低(P<0.05),而MDA-MB-231的侵袭率无统计学差异。低浓度的榄香烯乳可以促进HECV细胞的生长速率(=20μg/mL时,P<0.05)、粘附能力(=10μg/mL时,P<0.05)、迁徙能力(=10μg/mL时,P<0.05)及新生血管形成能力(=20μg/mL时,P<0.05);而高浓度的榄香烯乳则抑制其生长速率(≥80μg/mL时,P<0.05)、粘附能力(≥80μg/mL时,P<0.05)、迁徙能力(≥80μg/mL时,P<0.05)、新生血管形成能力(≥80μg/mL时,P<0.05)及细胞聚集能力(=160μg/mL,90min时,P<0.05)。榄香烯乳浓度为40μg/mL时,对比于对照组,镜下观察细胞的形态呈现典型的凋亡改变;MDA-MB-231细胞凋亡因子Caspase3(56.7±15.7vs.812.2±222.6,P=0.025)、Caspase8(140.3±25.6vs.327.8±50.1,P=0.032)表达升高,Caspase9(13.1±4.4vs.5.7±1.5,P=0.623)表达无统计学差异。结论:榄香烯乳注射液具有抑制乳腺癌细胞生长、粘附、迁移及侵袭的作用。而对于血管内皮细胞,低浓度的榄香烯乳注射液对其细胞功能具有促进作用,而高浓度的榄香烯乳则表现为抑制作用。榄香烯乳可以诱导乳腺癌细胞株MDA-MB-231的细胞凋亡。
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