细胞色素b₆f蛋白复合体（Cytochrome b₆f complex,Cyt b₆f）是一种在光合作用光能转换过程中起重要作用的膜蛋白超分子复合体,它位于光系统II和系统I之间,介导着两个光系统之间的线性电子传递和围绕系统I的循环电子传递;同时催化质子跨膜转移,形成跨膜的电化学梯度,为ATP的合成提供能量。2003年细菌（M.laminosus）和莱茵衣藻（C.reinhardtii）的Cyt b₆f的晶体结构就已获得了近原子水平的解析,但高等植物的Cyt b₆f的晶体结构至今仍未获得。高等植物的Cyt b₆f的晶体结构解析对于进一步揭示Cyt b₆f蛋白复合体的生理功能,进一步阐明光合作用高效转能及其调控的分子机理具十分重要的意义。为了得到高等植物的Cyt b₆f的晶体结构,我们以菠菜为实验材料,在原有的分离提纯Cyt b₆f蛋白复合体的流程基础之上进行了改进,使用改进后的方法从菠菜类囊体膜中分离提纯了纯度以及均一度都较高的Cyt b₆f制剂,并得到了Cyt b₆f的蛋白质晶体,经过X光衍射已经达到5?的分辨率。为今后获得高等植物的Cyt b₆f蛋白质晶体生长条件进一步优化和结构解析研究提供了实验基础。研究结果如下:1)对蛋白分离纯化流程进行了改进,主要是改变硫酸铵的饱和浓度、引入离子交换层析和改进蔗糖密度梯度离心的蔗糖浓度梯度这3方面,获得了高纯度和高均一性的蛋白样品。2)使用6个结晶条件筛选试剂盒,总计576个条件,对Cyt b₆f样品进行了结晶条件的筛选,并得到了18个晶体生长的条件;在此基础上优化结晶条件,得到了较高质量的晶体,经X光初步衍射,可以看到5?分辨率的衍射点。