研究背景： 口腔黏膜是口腔重要的组织结构，也是口腔免疫主要的介导部位和效应部位。随着免疫学的飞速发展，口腔疾病相关的免疫研究也取得长足的进步。其中CD4+T淋巴细胞在口腔免疫中的作用受到广泛重视，其介导的免疫应答异常，引发了某些常见的口腔黏膜免疫性病损。CD4+T细胞激活后在细胞因子参与下，向功能性亚群分化。亚群包括四类：Th1、Th2、Th17和Th3，它们分别以IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β为分化的标志性指标和主要效应因子，参与细胞免疫、体液免疫、炎症反应和免疫抑制。细胞因子既促进又相互制约CD4+Th亚群的分化，由此细胞因子对亚群分化有重要的调控作用。在局部组织免疫性病损中，通过固有免疫应答和适应性免疫应答，参与固有免疫的非淋巴细胞和活化的CD4+T细胞产生一系列细胞因子，调控CD4+Th亚群分化和效应，引发组织损伤。然而，在口腔黏膜病损的微环境中，CD4+T细胞分化相关细胞因子的表达状况尚不完全清楚。 建立一种CD4+T细胞介导的炎症反应模型能使我们较好的研究口腔黏膜免疫性病损的微环境，而CD4+T细胞介导的免疫应答的效应为DTH，呈现以单核/巨噬细胞浸润为主的局部性炎症，提示我们建立口腔黏膜DTH模型以便研究。在国外已有小鼠口腔黏膜DTH模型的报道，指出小鼠口腔黏膜可作为由远处皮肤或局部口腔激发引起DTH的反应部位，为我们利用该小鼠口腔黏膜DTH模型进行进一步研究提供依据。 目前，在口腔黏膜免疫性病损中，细胞因子微环境的表达状况尚不完全清楚。因而本课题拟在小鼠口腔黏膜DTH模型中，检测颊黏膜组织、颌下淋巴结及外周血中细胞因子IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β的表达，为了解口腔DTH病损中CD4+T细胞分化相关细胞因子的表达规律，为今后深入探讨口腔免疫性病损中细胞因子对各亚群分化的调控机制提供初步的研究依据。 目的： 在小鼠口腔黏膜DTH模型中检测颊黏膜组织、颌下淋巴结及外周血中细胞因子IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β的表达，初步探讨口腔DTH模型中CD4+T细胞分化相关细胞因子表达水平的变化规律。 方法： 1、实验分组与处理：在小鼠口周皮肤和颊黏膜涂抹2苯基—5唑酮(OXA)致敏，一周后在颊黏膜涂抹OXA激发，引发口腔黏膜DTH。并设置激发对照和正常对照，前者在未致敏小鼠口腔直接激发，后者为未作处理的正常小鼠。 2、T细胞分化相关细胞因子相对含量的检测：9例口腔黏膜DTH模型小鼠、5例激发对照小鼠和5例正常小鼠，取其外周血制备血清，ELISA检测血清中IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β浓度。 3、分别取上述小鼠外周血制备血清，ELISA检测血清中IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β浓度。 结果： 1、在所有颊黏膜标本中均能检测出IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β的表达，其相对含量表达范围均符合正态分布。IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β相对含量的表达水平三组间差异均无统计学意义。 2、在所有颌下淋巴结标本中均能检测出IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β的表达，其相对含量表达范围均符合正态分布。其中，IFN—γ相对含量的表达水平三组不全相同，DTH组较激发组及正常组高，差异有统计学意义；IL—4、IL-17和TGF—β相对含量的表达水平三组间差异均无统计学意义。 3、在所有外周血标本中均能检测出IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β的表达，其范围均符合正态分布。其中，IFN—γ和TGF—β的表达水平三组不全相同，DTH组较激发组及正常组高，差异有统计学意义；IL—4的表达水平三组不全相同，DTH组较激发组及正常组低，差异有统计学意义；IL-17表达水平三组间差异无统计学意义。 4、IFN—γ表达在颊黏膜与外周血有相关性，IL-17表达在颊黏膜与外周血有相关性。除此之外，IL—4和TGF—β表达在颊黏膜与外周血均无相关性，IFN—γ、IL—4、IL-17和TGF—β表达在淋巴结与外周血亦无相关性。 结论： 本课题在小鼠口腔黏膜DTH模型中检测到IFN—γ表达上调、IL4表达下调TGF—β表达上调的变化规律，提示在该DTH模型中细胞因子促进Th1、Th3和(或)Th17分化参与发病过程，并认为在局部与全身同时检测细胞因子必要。