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目的 探讨原发性肝癌（Hepatocellular Carcinoma, HCC）患者免疫功能变化,研究肝癥口服液改善HCC患者免疫功能的作用,揭示肝癥口服液含药血清体外抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡、阻断肝癌细胞周期和降低肝癌细胞VEGF表达的作用,从免疫学和肝癌细胞生物学行为两方面阐明肝癥口服液治疗HCC的机制。 方法1 病例选择及细胞、血清制备:选择Ⅱb期或Ⅲ期但没有远处转移、肝功能Child-Pugh B级,不能手术且无任何治疗干预、可配合实验的HCC患者（均符合1999年第四届全国肝癌学术会议修订的HCC诊断标准和临床分期标准）14例;健康志愿者30例。从中随机抽取HCC患者和健康志愿者各5例作为用药人群,给予肝癥口服液,40ml/日,连续8周。所有研究对象及用药人群用药后均抽取清晨空腹血10ml,2ml用2%EDTANa2抗凝,2ml用肝素抗凝,用于T细胞亚群和NK细胞测定;6ml血分离血清,0.22μm滤器过滤,分装,-80℃低温冰箱冻存,用于人肝癌细胞株SMMC-7721培养及细胞因子检测。2测定所有研究对象外周血T细胞亚群和NK细胞:静脉血2ml,2%EDTANa2抗凝,按照单抗说明书,应用流式细胞仪三色分析法,采取FSvSS设计方法,确定淋巴细胞群及NK细胞,应用ELITE4.5软件分析淋巴细胞表达,并记录。静脉血2ml,肝素抗凝,经细胞培养与染色后,应用流式细胞仪三色分析法,在前向散射光（FS）和侧向散射光（SS）散点图中圈定淋巴细胞群,分析CD4阳性细胞中IL-4-pe和INF-γ-fitc的表达,确定Th1及Th2亚群,并记录。3测定外周血中细胞因子含量:将冻存血清融化至室温,按说明书采用ELISA方法操作。4观察HCC患者、健康志愿者服药前后血清对肝癌细胞的增殖、凋亡和细胞周期的作用:肝癌细胞株SMMC-7721贴壁生长于10%FCS RPMI 1640营养液中,置于37℃,5%CO2培养箱中培养。A收获对数生长期细胞,向96孔板的25孔中各加入5×104 cell/ml细胞悬液100μl,共两板。培养40小时后,吸去培养液,10孔各加入服药人群用药