论文部分内容阅读
Conantokins (Con-)是芋螺活性肽的一个重要家族,能特异性作用于N-甲基-天门冬氨酸受体(NMDAR)及其亚型,是目前发现的该受体的唯一一类多肽抑制剂。NMDA受体NR2B亚基与镇痛、神经保护、戒毒等密切相关,NR2B亚基特异抑制剂对研发低副作用的镇痛、神经保护、戒毒药具有诱人前景。前期本实验室发现con-G及其突变体对吗啡依赖小鼠的催促戒断跳跃具有显著抑制作用,且抑制活性与其对NR2B亚基的选择性密切相关,但该类抑制剂对小鼠吗啡精神依赖没有研究。本论文在前期工作基础上,开展了对NMDA受体NR2B亚基选择性抑制剂Conantokins的进一步筛选并初步研究了其抑制吗啡身体依赖发展、精神依赖发展、表达的新功能的作用机理,获得了如下新结果：(1)筛选了21个conantokins天然肽及其突变体,找到了一种副作用低且特异性作用于NMDA受体NR2B亚基的抑制剂con-T-[M8Q],不仅能有效抑制小鼠的吗啡身体依赖的表达与发展,而且不影响小鼠的运动功能及自发活动。(2) Con-T-[M8Q]对小鼠的吗啡精神依赖的表达与发展具有显著抑制作用,5nmol/kg的剂量con-T[M8Q]几乎能完全抑制小鼠吗啡精神依赖的表达及发展。(3)研究了吗啡依赖小鼠在给不同剂量con-T-[M8Q]抑制剂后主要相关信号通路的变化,结果表明：Con-T[M8Q]能够抑制吗啡依赖小鼠NMDA受体NR2B亚基1472位酪氨酸的磷酸化水平,下调非磷酸化NR2B亚基的表达水平；除CaMKI mRNA的表达量和抑制剂剂量之间没有明显规律性变化外,CaMKIIa、β单体及CaMKIV mRNA的表达量均随抑制剂剂量的增高而降低；Con-T[M8Q]同时还下调ERK、c-fos蛋白的表达水平。该工作为吗啡依赖相关机理研究提供了一个很好的研究工具,并为相关抑制剂的应用提供了机理支持。